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1、分類號(hào):密級(jí):學(xué)校代碼:10069研究生學(xué)號(hào):Y20119020紅棗中環(huán)磷酸腺苷的分離純化及其口服液的開發(fā)SeparationandPurificationofcAMPfromRedJujubeandResearchofitsOralLiquid研究生姓名:段禹軒專業(yè)名稱:食品工程指導(dǎo)教師姓名:李建穎教授李有起高級(jí)工程師張斌高級(jí)工程師論文提交日期:2013年5月學(xué)位授予單位:天津商業(yè)大學(xué)摘要天然產(chǎn)物中的功能性成分既可以作為保健食品的關(guān)鍵
2、原料又可以入藥治療各種疾病,所以對(duì)天然產(chǎn)物中功能性成分的研究、分離、純化越來越重要。紅棗中含有含量很高的環(huán)磷酸腺苷(cAMP),其含量在180多種天然植物中是最高的。cAMP是細(xì)胞內(nèi)參與調(diào)節(jié)生物學(xué)功能和物質(zhì)代謝的重要物質(zhì),是生命信息傳遞的“第二信使”,它有著抗癌、抗氧化、幫助人體內(nèi)物質(zhì)代謝、提高人體免疫等功效。所以對(duì)紅棗中cAMP的分離純化的研究,以及利用分離純化出的cAMP做成附加值較高的保健食品,都有著較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)效益。本文
3、選擇紅棗為分離純化cAMP的實(shí)驗(yàn)原料。由于紅棗提取液中含有膠原蛋白、纖維素等物質(zhì),而這些物質(zhì)的存在影響了cAMP的抽提、分離和純化,故可以利用復(fù)合果漿酶對(duì)紅棗提取液進(jìn)行水解以消除這方面的影響。本實(shí)驗(yàn)主要通過水浴加熱浸提法以及離子交換法對(duì)紅棗中的cAMP進(jìn)行分離,經(jīng)過濃縮和真空冷凍干燥得到cAMP的凍于粉粗品。然后采用硅膠柱層析方法對(duì)其進(jìn)行純化,經(jīng)過濃縮和真空冷凍干燥后即可得到cAMP的凍干粉純品。采用高效液相色譜法作為cAMP的主要檢測(cè)
4、方法。本實(shí)驗(yàn)主要包括以下三部分內(nèi)容:f1)紅棗中cAMP浸提工藝的優(yōu)化將紅棗原料經(jīng)過清洗破碎后,加入適量的純水混勻,在不同實(shí)驗(yàn)條件(浸提時(shí)間,浸提溫度,料液比)下進(jìn)行熱水浸提。提取液經(jīng)0459m膜過濾后,用高效液相色譜法檢測(cè)cAMP的含量。通過對(duì)熱提取工藝的單因素和正交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析可以得知,cAMP分離的最佳工藝條件為:料液比1:4,浸提溫度80V,浸提時(shí)間5h。然后用甲酸改型后的陰離子交換樹脂進(jìn)行分離,經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮、真空冷凍
5、干燥處理后即可得到cAMP粗品。(:2)紅棗中cAMP純化工藝的優(yōu)化準(zhǔn)確稱取經(jīng)提取工藝分離的c腳粗品,按不同的上樣液影響條件(濃度、流速、pH值、)進(jìn)行純化處理。收集流出液經(jīng)o459in濾膜后,用高效液相色譜法檢測(cè)cAMP的含量。通過對(duì)純化工藝的單因素和正交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析可以得知,cAMP純化的最佳工藝條件為:上樣流速2mL/min、pH值45、濃度O5mg/mL。然后用乙酸乙酯:苯:甲醇(1:1:3)作為洗脫劑,對(duì)已經(jīng)吸附的硅膠柱進(jìn)行
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