發(fā)射近紅外熒光的熒光素衍生物的設(shè)計(jì)與合成.pdf_第1頁
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1、對(duì)于熒光分子探針而言,熒光團(tuán)是其關(guān)鍵組成部分,在配體識(shí)別待測(cè)物的過程中充當(dāng)熒光信號(hào),將待測(cè)物的識(shí)別信息表達(dá)出來。因此,熒光團(tuán)本身的光化學(xué)性能決定著熒光分子探針的光譜性能,其作用的重要性不言而喻。在為熒光分子探針選擇合適的熒光團(tuán)過程中,需從熒光團(tuán)的熒光量子產(chǎn)率、最大吸收與發(fā)射波長、光穩(wěn)定、Stocks位移、水溶性與脂溶性、生物毒性的大小、細(xì)胞穿透能力等因素來考慮。目前熒光素由于其具有優(yōu)良的光譜性能在熒光分子探針設(shè)計(jì)中被廣泛使用,熒光素基于

2、其醌式和內(nèi)酯式兩種結(jié)構(gòu)的互變異構(gòu),存在開環(huán)-閉環(huán)平衡體系,熒光素類染料在中性和酸性條件下以內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)存在,處于閉環(huán)狀態(tài),在可見光區(qū)幾乎不具有紫外吸收和熒光發(fā)射。其在堿性條件下是以醌式結(jié)構(gòu)存在,處于開環(huán)狀態(tài),在可見光區(qū)具有強(qiáng)烈的特征吸收和熒光發(fā)射,是優(yōu)良的開關(guān)型熒光團(tuán)。
  未經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾的熒光素,其最大吸收與熒光發(fā)射波長分別為490nm和525nm,以此設(shè)計(jì)合成的熒光探針最大吸收與熒光發(fā)射波長多數(shù)小于650nm。若應(yīng)用于生物細(xì)胞內(nèi),

3、則生物細(xì)胞內(nèi)的基體或某些雜質(zhì)在該波長區(qū)域內(nèi)可能會(huì)有吸收或熒光,而且光散射通常也會(huì)對(duì)背景產(chǎn)生較為嚴(yán)重的干擾,這嚴(yán)重影響了探針識(shí)別的準(zhǔn)確性。此外用短波長激發(fā)光照射生物樣品會(huì)對(duì)其有較大的損傷。
  作者在實(shí)驗(yàn)期間嘗試合成四個(gè)熒光素衍生物,成功合成了四個(gè)重要的中間體和一個(gè)熒光素衍生物。以2,3,3-三甲基吲哚為原料,通過引入甲基、雙鍵轉(zhuǎn)移得到1,3,3-三甲基-2-亞甲基吲哚,再分別與Vilsmeier試劑、丙二醛雙(苯亞胺)單鹽酸鹽合成

4、了吲哚醛中間體M1與吲哚醛中間體M2;以間苯二酚與鄰苯二甲酸酐為原料,經(jīng)傅克?;磻?yīng)、濃硫酸下縮合反應(yīng)合成了類熒光素母體M3;以熒光素為原料通過Reimer-Tiemann反應(yīng)合成了熒光素-單醛中間體M4,并對(duì)類熒光素母體M3六元雜環(huán)的構(gòu)建條件進(jìn)行了深入的研究,探索出了最佳的合成條件,對(duì)熒光素-單醛中間體M4的合成中催化劑的選擇做了深入研究,探索出最佳的兩個(gè)催化劑?;衔風(fēng)3與中間體均用核磁共振與質(zhì)譜分別進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確定。對(duì)化合物L(fēng)3做了

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