大腸桿菌生產(chǎn)琥珀酸的輔因子代謝調(diào)控研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩80頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、氧化還原輔因子NADH能為諸多生物基產(chǎn)品更高效的合成提供驅(qū)動力，ATP是胞內(nèi)維持細胞生長和活力的主要能量物質(zhì)。本課題通過提高大腸桿菌胞內(nèi)輔因子NADH、ATP的供給，以增強大腸桿菌合成琥珀酸的性能。通過擾動磷酸戊糖途徑（Pentose phosphate pathway，PP途徑），增強輔因子NADPH和NADH的轉(zhuǎn)化效率，過表達 ATP合成偶聯(lián)的關(guān)鍵酶基因，阻斷副產(chǎn)物合成途徑，琥珀酸得率從1.12 mol/mol葡萄糖提高到1.56

2、mol/mol葡萄糖，達到理論得率的91％。
　　PP途徑是細胞NADPH的主要來源，在大腸桿菌中NADPH可被轉(zhuǎn)氫酶SthA轉(zhuǎn)化為NADH，因此提高厭氧條件下PP途徑的通量，可為琥珀酸的合成提供還原力NADH。以大腸桿菌ZTK為出發(fā)菌，過表達谷氨酸棒桿菌解除變構(gòu)抑制的突變酶基因zwf(243)-gnd(361)，琥珀酸的得率從1.12 mol/mol葡萄糖增加到1.26 mol/mol葡萄糖，提高12.5%。進一步過表達了PP途

3、徑的相關(guān)基因pgl、talB、tktA，琥珀酸的得率提高至1.3 mol/mol葡萄糖。增強PP途徑通量后，過表達sthA（編碼轉(zhuǎn)氫酶SthA）促進NADPH轉(zhuǎn)化為NADH。發(fā)酵結(jié)果顯示，sthA的過表達明顯提高琥珀酸的得率，達到1.44 mol/mol葡萄糖，但菌體生長速率和琥珀酸合成速率都不同程度的下降。
　　為改進厭氧條件下菌體生長和琥珀酸合成速率，琥珀酸合成菌 WSA140中表達產(chǎn)琥珀酸放線桿菌的pck基因（偶聯(lián)ATP生成

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論