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![微納流控效應(yīng)在生物大分子濃集中的應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/14/18/f1318e86-6fd3-42c6-a349-b0636db3f08b/f1318e86-6fd3-42c6-a349-b0636db3f08b1.gif)
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1、核酸和蛋白質(zhì)作為生命科學(xué)中最重要的兩類生物大分子,一直是人們研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。濃縮在大幅度提高現(xiàn)有分析方法的檢測(cè)能力中起著關(guān)鍵的作用。納流控學(xué)的提出為濃縮方法的發(fā)展提供了新的途徑。微納界面上的濃度極化效應(yīng)備受關(guān)注,在微量樣品的在線預(yù)濃集中表現(xiàn)出獨(dú)特的性能,成為生物大分子濃縮的一個(gè)重要手段。本研究主體分為三個(gè)部分:
第一章對(duì)納通道的離子傳輸現(xiàn)象、濃度極化理論、應(yīng)用研究,特別是對(duì)生物大分子濃縮研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。
第二章
2、,考察了溴化乙錠(EB)和SYBR GreenⅠ染料和支持電解質(zhì)的離子強(qiáng)度對(duì)帶負(fù)電荷的DNA在石英毛細(xì)管微納界面處濃度極化的影響。在較低離子強(qiáng)度(0.1×TBE)下,DNA可在陰極端長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定濃縮,而在較高離子強(qiáng)度(1×TBE)下,兩種染料標(biāo)記的DNA、FITC-BSA以及小分子熒光探針均發(fā)生間斷性跨越微納界面向陽(yáng)極遷移的現(xiàn)象。用DNA的定位濃集和顯微熒光成像的方法對(duì)所用微納界面上的孔的個(gè)數(shù)進(jìn)行了表征。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),所使用刻蝕膜通常為一個(gè)孔
3、,只有少數(shù)情況兩孔同時(shí)存在。采用CCD成像方法對(duì)DNA濃集倍數(shù)進(jìn)行了估算。電場(chǎng)方向由膜外向膜內(nèi)時(shí)濃集約40 s,對(duì)0.0032ng/μL(2.0×10-13 mol/L)DNA的濃縮可達(dá)105倍。在基于Nafion的微納界面上也實(shí)現(xiàn)了對(duì)DNA的濃縮,得到了良好的濃縮效果。
第三章,利用電滲流(electroosmotic flow, EOF)將DNA濃縮帶轉(zhuǎn)移至激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)窗口進(jìn)行檢測(cè)的方法,考察了低離子強(qiáng)度下DNA的濃集
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