1、水華是富營養(yǎng)化淡水水體中，藻類（主要指藍藻）大量繁殖的一種現(xiàn)象，是水體富營養(yǎng)化的一種惡劣表現(xiàn)。隨著經(jīng)濟的發(fā)展，藍藻水華暴發(fā)日益頻繁，已威脅到人類的健康和水體生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定。國內(nèi)外環(huán)境工作者一直在致力于藍藻水華的預防和治理研究，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的方法很多，其中以生物操控法的應用前景最為廣闊。
　　本論文針對水體富營養(yǎng)化引發(fā)的藍藻水華問題，通過實驗室模擬的方法，以椎實螺為研究對象，初步驗證椎實螺作為藍藻水華非經(jīng)典生物操控物種的可行性，并對

2、其控藻理論進行了初步的實驗研究。具體而言，本研究初步驗證了椎實螺控藻的效果，對比了不同類螺抑制代表性藍藻物種——銅綠微囊藻的效果，研究了椎實螺控藻的量化關(guān)系;初步研究了投放椎實螺后的水樣中總氮的濃度變化及椎實螺的控藻機理。本論文通過研究新型操控物種，以期實現(xiàn)對藍藻水華的預防、控制、或治理，不僅具有現(xiàn)實的經(jīng)濟意義和實際的可操作性，而且可以實現(xiàn)無二次污染的綠色安全的水質(zhì)改善和環(huán)境治理，具有重要的環(huán)境科學與生態(tài)學意義。本論文的主要實驗結(jié)果如下

3、:
　　(1)椎實螺最適宜生長在水溫約20～23℃的環(huán)境中，為雌雄同體，卵生，螺卵包裹于卵袋中，實驗室條件下，椎實螺卵袋大小不定，正常卵袋約有80～90只卵，生長條件不適時，產(chǎn)圓形卵或卵袋較短（約有十來只卵），卵在卵袋中呈2～3列排布。螺卵喜附著于水箱壁或者曝氣石、水草等。椎實螺從產(chǎn)卵到完全孵化約7～12 d左右?？蛇x用蔬菜葉（白菜、生菜）喂養(yǎng)椎實螺，養(yǎng)殖水體可加入少量的水草，利于其棲息。
　　(2)為加快檢測速度，試圖以分

4、光光度法測藻細胞的OD值來表征銅綠微囊藻細胞密度。藻液在630 nm波長下的吸光度最高，因此，可選擇630 nm作為測量波長。研究發(fā)現(xiàn)，在一定的范圍內(nèi)，銅綠微囊藻細胞的葉綠素總質(zhì)量濃度、藻細胞數(shù)、吸光度(OD630nm)三者之間兩兩互為線性關(guān)系:葉綠素總質(zhì)量濃度、藻細胞數(shù)的線性相關(guān)系數(shù)為R2=0.9949;藻細胞數(shù)、吸光度(OD630nm)的線性相關(guān)系數(shù)為R2=0.9995;葉綠素總質(zhì)量濃度、吸光度(OD630nm)的線性相關(guān)系數(shù)為R2

5、=0.9922。因此，OD值大小可以準確表示藻細胞濃度的高低，且采用測定OD值的方法表征藻細胞濃度可簡化實驗過程，降低實驗操作的復雜性。
　　(3)驗證椎實螺抑制藍藻生長效果。分析結(jié)果表明，椎實螺可有效抑制混合藍藻和銅綠微囊藻的生長，且兩者的抑制效果相似:混合藍藻的實驗起始藻密度為3.5×105 Cell·ml-1，投加椎實螺2d，藻細胞密度降低迅速(T5為1.13×105 Cell·ml-1、T15為0.82×105 Cell·

6、ml-1)，未投加椎實螺的實驗組藻細胞呈上升趨勢(10.56×105 Cell·ml-1);銅綠微囊藻的實驗起始藻密度為1.76×106 Cell·ml-1，投加椎實螺7d后藻細胞密度降為零，未投加椎實螺的實驗組藻細胞呈上升趨勢(3.92×106 Cell·ml-1)。因此，可選擇銅綠微囊藻作為研究對象，避免混合藍藻中種群的不確定性。通過對比不同類螺（肺螺亞綱螺、前鰓亞綱螺）的實驗，發(fā)現(xiàn)肺螺亞綱的椎實螺比前鰓亞綱的中華圓田螺更耐受惡劣環(huán)

7、境，具有更好的研究價值。
　　(4)椎實螺抑制銅綠微囊藻的量化關(guān)系研究。實驗設計了兩種方案，第一種方案為椎實螺密度固定，而銅綠微囊藻的密度在一定范圍內(nèi)變化;第二種方案為藻細胞密度固定，投放的椎實螺密度在一定范圍內(nèi)變化。具體實驗條件為:①投放椎實螺的量(10 indi·L-1)不變、依次增加銅綠微囊藻起始藻細胞濃度(約為4.38×106 Cell·ml-1、14.25×106 Cell·ml-1、25.55×106 Cell·ml-

8、1);②銅綠微囊藻的起始藻細胞濃度（約為6.91×107 Cell·ml-1）不變、依次增加椎實螺的量(10、20、30 indi·L-1)。對比兩組實驗方案，椎實螺在這兩個條件下均能有效抑制藻類的生長，但兩套方案的抑制效果差異不顯著。因此，椎實螺控藻效果的臨界比例還有待深入研究。
　　(5)椎實螺控藻機理的初步研究。實驗發(fā)現(xiàn)，椎實螺培養(yǎng)液自身也具有控藻活性，即排除椎實螺之后的椎實螺培養(yǎng)液也可以抑制銅綠微囊藻的生長。所以，本論文研

9、究了各類處理后的椎實螺培養(yǎng)液的抑藻活性。實驗結(jié)果，發(fā)現(xiàn)經(jīng)0.22μm、0.45μm濾膜過濾后的過濾液無控藻活性，而濾膜上方物質(zhì)具有控藻活性，因此推測可能是椎實螺寄生、共生微生物有控藻作用。但是從水樣中分離的細菌、真菌（椎實螺附生微生物）均無控藻活性。對椎實螺培養(yǎng)液的鏡檢觀察發(fā)現(xiàn)，投放椎實螺控制藍藻的實驗組中，除少量銅綠微囊藻細胞外，還有其他可游動的微型生物。這些可游動的微型生物隨培養(yǎng)時間延長，數(shù)量逐漸增多。當藻類完全衰亡后2～3天，這些

10、微型生物逐漸減少。因此，推測這種未知微型生物可能導致椎實螺培養(yǎng)液具有控藻活性的原因。在顯微鏡下觀察此種具有控藻活性的未知微型生物時，其個體附近通常伴有銅綠微囊藻，形態(tài)為圓形或者橢圓形，直徑約1mm，一根鞭毛，鞭毛長度為身體的1.5倍左右。該未知微生物可懸浮于水中或者依附在瓶壁上生活，藻苔實驗說明該未知生物，脫離水體環(huán)境后可能會難以生存。根據(jù)形態(tài)學分析，該未知微型生物可能屬于鞭毛蟲類原生動物，可能屬于動鞭毛亞綱。
　　(6)投放椎實

11、螺對水樣中總氮的研究發(fā)現(xiàn)，投放椎實螺對水體中總氮濃度變化的影響不大。但是，較短的實驗時間內(nèi)，由于對照組藻細胞的大量繁殖，而投放椎實螺的實驗組水體中藻細胞幾乎絕跡，藻類利用氮元素的效率下降，所以總氮的降低幅度不及未投放椎實螺的實驗組顯著。
　　(7)本論文還對喂食銅綠微囊藻的椎實螺所排泄的螺糞進行了研究。取椎實螺培養(yǎng)液水樣底部螺糞，于顯微鏡下觀察，視野內(nèi)未見完整藻細胞。并將螺糞于BG-11培養(yǎng)基中培養(yǎng)，始終未發(fā)現(xiàn)藻細胞生長的發(fā)生。由

12、此說明，椎實螺幾乎可完全消化濾食的藻細胞，椎實螺作為操控生物具有重要的研究意義。
　　通過本論文實驗研究，對椎實螺生活習性有了初步了解，驗證了OD值大小可準確表示藻細胞濃度的高低。實驗發(fā)現(xiàn)，椎實螺可有效抑制混合藍藻和銅綠微囊藻的生長，肺螺亞綱的椎實螺較前鰓亞綱的中華圓田螺更耐受惡劣的水體環(huán)境，但是椎實螺抑制銅綠微囊藻的量化關(guān)系的臨界比例還有待進一步研究;椎實螺培養(yǎng)液水樣具有控藻活性，可能是水樣中椎實螺寄生、共生微生物具有控藻活性;