1、重金屬具有親脂性、難降解性和高富集性，容易在海洋生物體內(nèi)積累，通過食物鏈進行放大，海水中微量濃度的重金屬即可引起生物機體的氧化應激和氧化損傷甚至導致生物死亡。因此，尋找能夠快速、準確監(jiān)測海洋環(huán)境中重金屬污染水平的方法，對于及時掌握海水污染程度及生態(tài)風險性評價十分必要。
　　運用生物標志物法監(jiān)測海水重金屬污染，能夠反映海水中多重金屬對生物的混合效應，靈敏度高且專一性較強。海洋雙殼類金屬硫蛋白(MTs)即是重金屬毒性監(jiān)測中常用的一類生

2、物標志物。但是，相同重金屬對不同物種MTs的誘導規(guī)律存在較大差異，即使同一物種其不同組織MTs對重金屬暴露的響應程度也不相同，顯示在重金屬生物監(jiān)測方面應選擇適宜的生物種類和組織類型。定量監(jiān)測海水重金屬污染水平則需要獲得重金屬濃度—MTs誘導量及暴露時間—MTs誘導量的響應關(guān)系方程。另外，由于海水溫度、pH值、鹽度等因子的波動會對生物產(chǎn)生直接或間接的干擾，影響其體內(nèi)MTs的水平，造成海域現(xiàn)場監(jiān)測結(jié)果的不準確性。
　　本研究以中國沿海

3、海域常見的雙殼類生物——菲律賓蛤仔（Ruditapesphilippinarum）為實驗對象，分別選用含單一重金屬離子Cu2+、Zn2+、Cd2+、Hg2+的人工海水對蛤仔進行暴露培養(yǎng)，通過測定重金屬在鰓和內(nèi)臟中的總含量及可溶性含量變化，分析其在蛤仔組織中的富集規(guī)律;根據(jù)蛤仔鰓和內(nèi)臟中MTs的水平隨暴露濃度和時間的變化，選擇適用于指示單一重金屬污染的組織類型，并確定指示重金屬污染的最佳濃度范圍和暴露時間。研究結(jié)果表明:蛤仔內(nèi)臟比鰓更容易

4、蓄積海水中的Cu2+、Zn2+、Cd2+、Hg2+，50μg/L Cu2+、100μg/L Zn2+、50μg/LCd2+、5μg/L Hg2+分別暴露5d后蛤仔鰓對4種重金屬的BCF值分別為53.6、280.8、20.6、282.8，內(nèi)臟的BCF值分別為676.8、268.1、47.4、565.6。進入鰓和內(nèi)臟中的Cu2+和Cd2+主要以游離態(tài)形式存在，而Zn2+、Hg2+暴露下，亞細胞組分中的Zn、Hg主要以不溶形式存在。組織內(nèi)富集

5、金屬Cu、Cd、Hg與相應組織中MTs含量之間的關(guān)系呈冪函數(shù)關(guān)系或負指數(shù)關(guān)系，而Zn的蓄積與MTs之間的關(guān)系可以用直線方程表征。蛤仔內(nèi)臟MTs對Cu2+暴露更為敏感，而鰓MTs則更適合指示海水Zn2+、Cd2+或Hg2+等重金屬污染水平。
　　在研究重金屬單—暴露的基礎(chǔ)上，分別將上述重金屬離子2種或4種混合，研究復合污染下蛤仔MTs的響應規(guī)律，并與單一金屬暴露相比較，探討2種或4種重金屬對蛤仔MTs的聯(lián)合誘導效應機制。結(jié)果表明:雙

6、重金屬和四重金屬聯(lián)合與對照組相比均能顯著誘導蛤仔鰓和內(nèi)臟MTs的合成。（Cu2+-Zn2+）聯(lián)合暴露5d，蛤仔鰓和內(nèi)臟MTs含量隨混合金屬濃度升高表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，隨著(Cu2+-Zn2+)混合濃度的增大，其對鰓MTs的聯(lián)合誘導表現(xiàn)為協(xié)同—相加—拮抗效應，對內(nèi)臟MTs則表現(xiàn)為協(xié)同—拮抗效應。較低濃度(Cd2+-Hg2+)聯(lián)合暴露響對MTs的誘導能力遠遠大于高濃度組，隨著（Cd2+-Hg2+）混合濃度的增大，其對鰓MTs的聯(lián)合誘導

7、表現(xiàn)為協(xié)同—相加—拮抗效應，對內(nèi)臟MTs則表現(xiàn)為協(xié)同—拮抗效應。在4種重金屬離子聯(lián)合暴露下，重金屬濃度較低時，對鰓MTs聯(lián)合誘導效應表現(xiàn)為相加作用，隨著濃度增大則轉(zhuǎn)變?yōu)檗卓棺饔茫鴮?nèi)臟MTs的聯(lián)合誘導均表現(xiàn)為拮抗作用。
　　研究非生物因子對蛤仔MTs的干擾程度，對復合污染下蛤仔MTs的響應值隨海水溫度、鹽度、pH值的變化趨勢進行了初步探索，辨析這些因子的干擾作用并采取適宜方法對測定結(jié)果加以校正，以便于在消除非生物因子影響的前提下

8、進行重金屬綜合污染水平評價。結(jié)果表明:上述非生物因子中溫度、鹽度變化對MTs的響應值影響較大，pH值的影響相對較小。①在蛤仔適宜生長的海水溫度范圍(5～20℃)內(nèi)，無論是低濃度還是高濃度重金屬污染區(qū)，鰓、內(nèi)臟的MTs含量均隨溫度升高而增加，同等污染水平在20℃時對MTs的誘導量最高。高、低濃度污染區(qū)的鰓MTs含量以及高濃度污染區(qū)的內(nèi)臟MTs含量，與溫度之間呈現(xiàn)顯著正相關(guān)性，可直接采用內(nèi)插法，將MTs含量實測值轉(zhuǎn)換為15℃時的校正值。②蛤

9、仔MTs對重金屬暴露的響應值受鹽度影響呈“階梯”狀變化。如果以鹽度30時的測定值作為基準值，以下情況無需進行校正:重污染區(qū)、鹽度為20～35時，鰓MTs含量;鹽度在20～35范圍內(nèi)時，低污染、重污染區(qū)內(nèi)臟MTs含量。其他鹽度范圍下，所測定的鰓或內(nèi)臟MTs均需采用內(nèi)插法進行校正。③蛤仔MTs對重金屬的響應受海水pH值的影響較小。以pH8.0的測定值作為基準，如果采用鰓MTs含量指示重金屬綜合污染水平，在海水pH為7.5～9.0（低污染區(qū)）