![](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/14/17/7912e01e-d754-4f2b-b15c-a33e7995db0f/7912e01e-d754-4f2b-b15c-a33e7995db0fpic.jpg)
![鹵醇脫鹵酶轉(zhuǎn)化特定底物研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/14/17/7912e01e-d754-4f2b-b15c-a33e7995db0f/7912e01e-d754-4f2b-b15c-a33e7995db0f1.gif)
版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、脫鹵酶又叫去鹵化酶,是可以催化碳鹵鍵水解斷裂產(chǎn)生相應(yīng)的醇和離子的酶。現(xiàn)在已經(jīng)知道的脫鹵酶的種類主要有5種,分別是烷基脫鹵酶,鹵代酸脫鹵酶,4-氯苯甲酰-輔酶A脫鹵酶,鹵代醇脫鹵酶,3-鹵丙烯酸脫鹵酶。脫鹵酶的作用是能夠降解環(huán)境中的很多鹵化污染物,并且還能夠介導(dǎo)很多有機(jī)鹵化物脫鹵反應(yīng),使其成為重要的藥物中間體。因此,脫鹵酶長(zhǎng)期以來(lái)一直是人們研究的熱點(diǎn)之一。
本文以特定的底物對(duì)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的菌株進(jìn)行篩選,然后將篩選到的菌株進(jìn)行鑒定,
2、對(duì)產(chǎn)脫鹵酶的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,脫鹵酶酶活的測(cè)定,進(jìn)行放大實(shí)驗(yàn)。
首先是以1,3-二氯丙醇為底物,從實(shí)驗(yàn)室保藏的菌株中進(jìn)行篩選,篩選到一株對(duì)底物轉(zhuǎn)化率比較高的菌株。然后對(duì)這株轉(zhuǎn)化率比較高的菌株進(jìn)行鑒定,鑒定結(jié)果為放射形土壤桿菌。然后對(duì)轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,分別確定了最佳碳源、氮源、混合磷酸鹽。對(duì)發(fā)酵條件的優(yōu)化分別從裝液量、種子培養(yǎng)時(shí)間、接種量、發(fā)酵溫度、初始 pH值,搖床轉(zhuǎn)速、轉(zhuǎn)化時(shí)間、底物添加量等幾個(gè)方面進(jìn)行了優(yōu)化。
3、最優(yōu)轉(zhuǎn)化條件如下:最佳碳源為蔗糖,最佳濃度為45 g/L;最佳氮源為蛋白胨,最佳濃度為10 g/L;混合磷酸鹽(磷酸氫二銨和磷酸氫二鉀)為2.6g/L,裝液量為50 mL/250 mL,接種種齡為16 h,接種量為6%,最佳的底物添加量為40 mg/mL,最適培養(yǎng)溫度為30℃,搖床轉(zhuǎn)速為160 r/min,培養(yǎng)基初始pH為7.0,轉(zhuǎn)化時(shí)間為48 h;通過(guò)底物溶解方式的優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)使用乙醇溶解的時(shí)候轉(zhuǎn)化率最高,所以確定溶解方式為用乙醇溶解。
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 鹵醇脫鹵酶HheC的固定化研究.pdf
- 鹵醇脫鹵酶的改造與發(fā)掘.pdf
- 創(chuàng)建快速進(jìn)化策略研究鹵醇脫鹵酶碳末端功能.pdf
- 鹵醇脫鹵酶HheA表達(dá)優(yōu)化及定向進(jìn)化.pdf
- 鹵醇脫鹵酶HheA的改造和生物催化特性的研究.pdf
- 氧化還原酶-鹵代醇脫鹵酶多酶法合成手性β-羥基腈.pdf
- 鹵醇脫鹵酶HheC的高效表達(dá)與純化及其酶活檢測(cè)方法的研究.pdf
- 定向進(jìn)化提高鹵代醇脫鹵酶HHDH的催化活性.pdf
- 基于定向進(jìn)化方法改進(jìn)鹵醇脫鹵酶HheC的熱穩(wěn)定性.pdf
- 鹵醇脫鹵酶HheC的改造及其在手性藥物合成中的應(yīng)用.pdf
- 8395.三維結(jié)構(gòu)指導(dǎo)的鹵醇脫鹵酶hhec鹵離子結(jié)合位點(diǎn)的改造
- 基于組合設(shè)計(jì)策略提高鹵醇脫鹵酶HheC降解2,3-DCP的活性.pdf
- 應(yīng)用半理性設(shè)計(jì)策略提高鹵醇脫鹵酶HheC的活性和立體選擇性.pdf
- 鋅離子對(duì)重組大腸桿菌P84AMC1061表達(dá)鹵醇脫鹵酶的調(diào)節(jié)作用研究.pdf
- 1785.應(yīng)用紅外光譜檢測(cè)鹵醇脫鹵酶催化活性及初步研究其催化過(guò)程的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)
- C2-C3鹵代酸脫鹵酶的篩選及克隆表達(dá).pdf
- 鹵醇脫鹵酶的表達(dá)、改造及其在(R)-4-氰基-3-羥基丁酸乙酯合成中的應(yīng)用.pdf
- 含鹵有機(jī)廢物機(jī)械化學(xué)脫鹵工藝及機(jī)理研究.pdf
- 含脫鹵酶菌種的篩選.pdf
- 分子改造提高鹵醇脫鹵酶HheAAM催化制備(3R,5R)--6--氰基--3,5--二羥基己酸叔丁酯的酶活.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論