以多聚賴氨酸為載體的雙酚A包被抗原制備及其免疫分析研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、雙酚A(BPA)是一種內(nèi)分泌干擾物,影響生殖系統(tǒng)的發(fā)育。雙酚A還可導(dǎo)致前列腺癌、神經(jīng)系統(tǒng)和胰腺功能混亂。雙酚A是一種重要的有機(jī)化工原料,被用于生產(chǎn)環(huán)氧樹脂與聚碳酸酯類產(chǎn)品,而這兩類產(chǎn)品在食品包裝、食具、塑料瓶等方面應(yīng)用廣泛。雙酚A在一定條件下會(huì)因溶出、遷移和排放等原因進(jìn)入生態(tài)環(huán)境,進(jìn)而對人體健康造成潛在危害。為此,建立一種快速檢測雙酚A的方法具有十分重要的意義。
   本文利用雙酚A結(jié)構(gòu)類似物為半抗原,采用碳二亞胺法將雙酚A半抗

2、原與牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)等載體偶聯(lián)合成雙酚A免疫抗原,再將雙酚A半抗原與多聚賴氨酸(PLL)、雞血清白蛋白(OVA)偶聯(lián)制備包被抗原。用雙酚A免疫抗原免疫新西蘭兔,以制備其多克隆抗體。選取最佳的免疫抗原免疫Balb/c鼠,取其脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞SP2/0融合,經(jīng)多次亞克隆篩選出高性能的單克隆細(xì)胞株。分別利用制備的多克隆抗體和單克隆抗體,建立了雙酚A免疫分析方法。
   利用雙酚A多克隆抗體,優(yōu)化免疫

3、分析條件,分別建立檢測雙酚A的酶聯(lián)免疫分析吸附法和熒光免疫分析法。建立的酶聯(lián)免疫分析方法線性范圍為1.3ng/mL~292.2ng/mL,最低檢測限是0.5ng/mL,樣品加標(biāo)回收率為86.7%~109.2%。用酶聯(lián)免疫分析法研究西洋菜對雙酚A的去除能力,結(jié)果表明對其去除效果較好。熒光免疫分析的的線性范圍為2.4ng/mL~1279.5ng/mL,最低檢測限是0.8ng/mL,樣品回收率為89.3%~110.6%。由此可知,建立的酶聯(lián)免

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