1、本研究以FR-008/殺念菌素基因簇中各功能基因包括其編碼的聚酮合酶功能模塊和結構域為主線,以化學結構分析及化學檢測貫穿其中,通過定向的基因改造獲得了衍生的新結構化合物.多烯大環(huán)內酯是一類在大環(huán)內酯中包含3-8個連續(xù)雙鍵的聚酮化合物.本研究首先獲取了兩個附加的柯斯質粒從而覆蓋了完整的FR-008/殺念菌素基因簇并完成了FR-008/殺念菌素全基因簇的序列測定.之后對FR-008/殺念菌素抗生素基因簇中各功能基因包括各聚酮合酶功能模塊和結

2、構域進行了詳細的分析,加上對FR-008/殺念菌素抗生素復合物各組分的化學分析,提出了FR-008/殺念菌素生物全合成的分子模型,而且提出了FR-008/殺念菌素復合物中四個結構相關化合物之間相互轉換模式及其與基因或結構域功能之間一一對應的關系,從而形成了對FR-008/殺念菌素進行定向基因改造的基礎.而且預測了FR-008/殺念菌素分子中兩個順式雙鍵的存在和其糖基相對于多烯大環(huán)內酯環(huán)的方向并進一步提出了FR-008/殺念菌素分子生物合

3、成途徑中的立體模型.中斷FR-008/殺念菌素生物合成的糖基轉移酶基因fscMI獲得了一簇結構相關的脫糖FR-008/殺念菌素衍生新結構化合物;中斷FR-008/殺念菌素生物合成中的GDP-酮糖轉氨酶基因fscMII得到了一簇結構相關的攜帶新型糖基(3-酮基-6-脫氧-D-甘露糖)的FR-008/殺念菌素衍生化合物.同時證實了GDP-酮糖轉氨酶基因fscMII的功能,亦證明FR-008中糖基轉移酶FscMI具有相對的底物識別彈性.另外,