脂肪酶固定化新方法研究及其應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、本文以有機(jī)相中酶法拆分消旋烯丙醇酮為模型反應(yīng),以制備高活性、高穩(wěn)定性和高選擇性的固定化酶為目標(biāo),從固定化載體材料以及固定化方法兩個(gè)方面研究固定億過程對(duì)酶催化性能的影響規(guī)律及作用機(jī)制,研究新型的脂肪酶固定化方法。主要內(nèi)容如下:
   開發(fā)了以核苷酸鋯納米顆粒作為載體固定化節(jié)桿菌脂肪酶(ASL)的方法,考察了固定化時(shí)間、緩沖液pH值和濃度以及酶量等因素對(duì)固定化酶在有機(jī)相中催化性能的影響。結(jié)果表明當(dāng)催化烯丙醇酮的轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)時(shí),一元尿苷

2、酸鋯是較佳載體(粒徑30-50nm)。固定化酶的活力回收率可達(dá)680%,對(duì)映體選擇率(E=200)比游離酶(E=86)有較大提高。以其作為載體制備獲得固定化酶的操作穩(wěn)定性得到顯著提高,重復(fù)利用20批次后殘余活力為58.7%,而游離酶僅為4%。
   考察了假絲酵母脂肪酶(CRL)在不同載體表面吸附過程和制備獲得的固定化酶的催化活力。結(jié)果顯示對(duì)于Zr(AMP)2-CRL、Zr(GMP)2-CRL和Zr(CMP)2-CRL,催化水解

3、反應(yīng)的效率分別為游離酶的20、15和11倍。在固定化過程中加入了磷脂,使得固定化酶在極性溶液中有很好的分散性,并且在有機(jī)相催化活力、熱穩(wěn)定性、重復(fù)利用性等方面均比游離酶有顯著改善。
   開發(fā)了以磁性多孔微粒作為載體固定化脂肪酶的方法,進(jìn)行了載體物理化學(xué)性質(zhì)測(cè)定與分析,考察了固定化時(shí)間、酶量和緩沖液pH值等因素對(duì)固定化酶在有機(jī)相中催化性能的影響。結(jié)果表明,制備的磁性微粒是以Fe3O4為磁核,呈現(xiàn)多孔,固定化酶的活力回收率可達(dá)24

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