豬屠宰副產(chǎn)物中胃蛋白酶和胃膜素分離提取工藝研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、隨著我國生豬養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展,生豬屠宰副產(chǎn)物隨之大量增加,只有這些副產(chǎn)物的深加工跟上養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展步伐,生豬養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟效益才能提高、資源的浪費才能減少,而生化制藥是綜合利用生豬屠宰副產(chǎn)物的有效途徑之一,因此,本試驗研究利用生豬屠宰副產(chǎn)物制取胃蛋白酶和胃膜素。
   豬胃黏膜可分為胃底部黏膜和幽門區(qū)黏膜兩部分,研究證明,胃底部黏膜的胃蛋白酶活力約為幽門區(qū)黏膜的3.05倍,因此,將胃底部黏膜作為制取胃蛋白酶的原料;試驗證明,幽門區(qū)黏

2、膜含有胃膜素,因此將幽門區(qū)黏膜用來制取胃膜素。
   胃蛋白酶的制取可分為提取、分離、純化三步。以豬胃底部黏膜為原料,優(yōu)化胃蛋白酶的酸法浸提工藝,選取液料比、提取溫度、鹽酸體積分數(shù)、提取時間4個因素,對吸光度進行評價,在單因素試驗基礎(chǔ)上,采用二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計優(yōu)化胃蛋白酶的提取工藝,結(jié)果表明,最佳提取條件為液料比0.76:1(mL/g)、鹽酸體積分數(shù)4.01%、提取溫度44.9℃、提取時間1.49h;然后探索PEG/(NH

3、4)2SO4雙水相萃取和殼聚糖沉淀相結(jié)合分離豬胃蛋白酶,并對兩方法的主要影響因素進行考察。研究表明,PEG-1000質(zhì)量分數(shù)為20%、(NH4)2SO4質(zhì)量分數(shù)為15%組成的雙水相體系最佳,在此條件下,豬胃蛋白酶的分配系數(shù)K為75.3、萃取率y為98.9%,純化倍數(shù)為3.25;對上述雙水相系統(tǒng)的上相溶液進行殼聚糖沉淀,最佳沉淀條件為:殼聚糖添加量為2.5mg/mL上相溶液、復合pH5.9,此時,豬胃蛋白酶純化倍數(shù)達7.83,比僅雙水相萃

4、取的純化倍數(shù)提高了4.58;最后用DEAE-纖維素離子交換層析法純化豬胃蛋白酶,經(jīng)透析、真空冷凍干燥得到胃蛋白酶粉末。經(jīng)檢測,1g所得產(chǎn)品中含胃蛋白酶活力為9145.9單位(大于3800單位),符合中華人民共和國藥典二部(2005年版)的規(guī)定。
   以豬幽門區(qū)黏膜為原料,優(yōu)化胃膜素的提取工藝。以鹽酸溶液為提取液,選取液料比、提取溫度、鹽酸體積分數(shù)、提取時間4個因素,對胃膜素得率進行評價,在單因素試驗基礎(chǔ)上,采用二次回歸正交旋轉(zhuǎn)

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