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![三維有序大孔材料固定化酶的制備及催化性能.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/14/17/026dc0f5-356b-4e96-87dd-69586648e76b/026dc0f5-356b-4e96-87dd-69586648e76b1.gif)
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文檔簡介
1、三維有序大孔材料因其開放、連通的大孔及孔窗結(jié)構(gòu),在酶的固定化方面有廣泛應用。本論文以三維有序大孔氧化硅為載體,分別利用共價結(jié)合法及包埋法進行酶的固定化研究,主要內(nèi)容如下:
(1)三維有序大孔氧化硅仿生粘合固定化雙酶及催化性能。以多巴胺修飾的三維有序大孔氧化硅為載體,通過多巴胺與酶的共價結(jié)合作用制備固定化雙酶(GOD/HRP@3DOM-SiO2)。固定化過程的優(yōu)化確定GOD與HRP活性比為50 U:37.5 U;GOD/HRP@
2、3DOM-SiO2相對于游離酶有更好的熱穩(wěn)定性,65 oC PBS緩沖液中浸泡40 min,仍能保持21.41%的初始活性;GOD/HRP@3DOM-SiO2對葡萄糖檢測有較高的靈敏性,檢測限為0.99μmol/L;GOD/HRP@3DOM-SiO2相對于其他形式酶表現(xiàn)出更好的催化性能,且對葡萄糖有高度專一性。
(2)含酶三維有序大孔氧化硅的原位構(gòu)建及催化性能。以水溶性聚丙烯酰胺為模板,向模板間隙填充含酶溶膠,凝膠老化后以緩沖
3、溶液去除模板即制備含酶三維有序大孔氧化硅(3DOM-GOD/SiO2)。SEM、TEM及N2吸附-脫附實驗表明,3DOM-GOD/SiO2具有有序的大孔結(jié)構(gòu)且富含介孔,孔徑分別為500及6.56 nm;CLSM實驗表明,酶被成功包埋到硅材料中;固定化過程優(yōu)化確定GOD的包埋濃度為12mg/mL;3DOM-GOD/SiO2的熱穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性及對變性劑的耐受性較游離酶有顯著提高;動力學實驗表明,大孔及介孔結(jié)構(gòu)對物質(zhì)傳輸有一定幫助作用,有
4、利于傳質(zhì)阻力降低;分別以葡萄糖氧化酶及有機磷降解酶為模型酶,制備3DOM-GOD/SiO2及3DOM-OPH/SiO2,并分別用于溶液中葡萄糖及甲基對硫磷的檢測,發(fā)現(xiàn)其對極低濃度葡萄糖及甲基對硫磷有良好的響應,檢測限分別為0.91μmol/L和0.46μmol/L。
?。?)含雙酶三維有序大孔氧化硅的原位構(gòu)建及催化性能。制備含雙酶三維有序大孔氧化硅,并用于低聚異麥芽糖中葡萄糖的去除。SEM、TEM及N2吸附-脫附實驗表明,含雙酶
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