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![牛奶中蛋白質(zhì)和17種β-興奮劑的分析方法研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/14/18/aa2eeec5-9aea-471e-95ba-2f94bda2b3dd/aa2eeec5-9aea-471e-95ba-2f94bda2b3dd1.gif)
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文檔簡介
1、牛奶營養(yǎng)豐富,是人們?nèi)粘I钪胁豢扇鄙俚娘嬈?,牛奶質(zhì)量和食用安全一直備受關(guān)注,牛奶質(zhì)量問題主要來源于兩方面,一是非蛋白氮的非法添加,二是奶牛食用飼料中添加的獸藥或者藥用獸藥殘留引起的。因此,研究建立方法測定牛奶中蛋白質(zhì)的含量,及檢測獸藥殘留量具有重要意義。
本文建立了測定牛奶蛋白質(zhì)的反相高效液相色譜分析方法,對前處理方法進(jìn)行了優(yōu)化,采用Agilent Zorbax300SB-C8(250 mm×4.6 mm,5μm)色譜柱
2、分離,三氟乙酸-水-乙腈做為流動相,梯度洗脫,紫外檢測器,214nm單波長檢測,柱溫45℃,外標(biāo)法定量。測定κ-CN、αs2-CN、αs1-CN、β-CN和Whey的線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.999,加標(biāo)回收率在74.8%~132.5%之間。另外,該方法可以分離大豆的植物蛋白質(zhì)和牛奶中主要蛋白質(zhì),因此,可作為牛奶中添加植物蛋白質(zhì)的檢測方法。
采用本方法分析了9種牛奶樣品蛋白質(zhì)的含量,結(jié)果表明,本方法測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
3、不同樣品中4種酪蛋白與乳清蛋白的比例基本接近,但是不同品牌之間存在一定差異。
本文建立了高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時檢測牛奶中17種β-興奮劑。牛奶樣品前處理過程采用3%的三氯乙酸水溶液沉淀蛋白質(zhì),4℃,5000rpm離心去脂,取上層清液,經(jīng)Waters Oasis MCX固相萃取柱凈化,洗脫液經(jīng)氮?dú)獯蹈?,然后用流動相?fù)溶,過濾。采用Waters XBridge TMShield RP18(50 mm×2.1mm,2.5μm
4、)色譜柱,以0.1%甲酸溶液-甲醇為流動相,梯度洗脫,進(jìn)行液相色譜分離,最終采用電噴霧串聯(lián)四極桿質(zhì)譜進(jìn)行檢測。結(jié)果表明,除氧烯洛爾(12.33~493.20 ng·mL-1)外,其余16種藥物在0.37~24.40 ng·mL-1范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.997。3個水平添加,樣品的平均加標(biāo)回收率為61.6%~115.7%。17種藥物的方法檢出限為0.024~3.96 ng·g-1,方法定量限為0.354~13.20ng·
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