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1、多糖是猴頭菌中的主要活性物質(zhì),目前,市場(chǎng)上銷售的猴頭菌制品大部分只進(jìn)行了簡(jiǎn)單加工,存在大量雜質(zhì),即便是猴頭菌多糖制品,也多為未經(jīng)優(yōu)化的粗多糖,含有較多蛋白質(zhì)、色素,影響色澤的同時(shí)也不利于多糖最佳功效的發(fā)揮。所以找到適用于工業(yè)生產(chǎn)的粗多糖制備工藝及如何得到生物活性好的多糖至關(guān)重要。本論文對(duì)猴頭菌粗多糖的水提醇沉制備工藝各參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化,對(duì)猴頭菌多糖的脫色方法進(jìn)行了詳細(xì)研究,并比較了脫色前后猴頭菌多糖的理化性質(zhì)及生物活性,為猴頭菌多糖的深度
2、開發(fā)利用奠定了理論基礎(chǔ)。論文的主要內(nèi)容如下:
1、采用單因素實(shí)驗(yàn)詳細(xì)考察了水提醇沉中影響猴頭菌多糖得率及含量的各個(gè)因素,并對(duì)幾種多糖的干燥方式進(jìn)行了比較,篩選出適合猴頭菌多糖的干燥方式;選取對(duì)猴頭菌多糖得率及含量有較大影響的因素通過正交實(shí)驗(yàn)得到優(yōu)化的提取醇沉工藝為熱水提取兩次,乙醇終濃度為70%,液料比15∶1,濃縮比3∶1。通過各種酶法提取與對(duì)照的比較,對(duì)酶法提取方法進(jìn)行了探索,發(fā)現(xiàn)大部分單一酶并不能提高多糖的得率及含量
3、。
2、以脫色率,多糖保留率及體外免疫活性為指標(biāo),對(duì)三種常用的脫色方法進(jìn)行比較,得出大孔樹脂更適合用于猴頭多糖的脫色。從十種不同類型的大孔樹脂中篩選出大孔弱堿性陰離子樹脂D315最適合于猴頭菌粗多糖的脫色。以脫色率,多糖保留率為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過考察影響猴頭菌粗多糖脫色的各個(gè)因素,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,運(yùn)用Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法,建立了脫色率及多糖保留率與樹脂體積(mL)、脫色時(shí)間(h
4、)、樣品濃度(mg/mL)之間的二次回歸模型,在響應(yīng)曲面圖和等高線圖的分析基礎(chǔ)上,對(duì)回歸模型進(jìn)行數(shù)學(xué)分析得到優(yōu)化的靜態(tài)脫色工藝為:100mL加入樹脂37.12mL,脫色時(shí)間6小時(shí),粗多糖濃度為13.85 mg/mL,脫色率(%)及多糖保留率(%)的理論值分別為70.59%和81.12%。在靜態(tài)脫色的基礎(chǔ)上,對(duì)動(dòng)態(tài)脫色的工藝進(jìn)行了研究,得到優(yōu)化的動(dòng)態(tài)脫色工藝:流速為0.6BV/h,上樣量270mL,大孔樹脂D315在進(jìn)行簡(jiǎn)單預(yù)處理后,可重
5、復(fù)使用八次以上。
3、對(duì)猴頭菌多糖脫色前后的理化性質(zhì)(多糖含量、蛋白含量、分子量分布、單糖組成、特征基團(tuán))、體外免疫活性及對(duì)大鼠胃黏膜損傷修復(fù)作用進(jìn)行了比較研究。研究表明,猴頭菌多糖脫色后,多糖含量有小幅度提高,蛋白含量下降明顯,單糖組成種類不變,巖藻糖所占比例略有下降,半乳糖及葡萄糖比例略有上升,C=O基團(tuán)的振動(dòng)減弱。粗多糖中含有β構(gòu)型多糖,脫色過程可能使β構(gòu)型多糖富集。
猴頭菌多糖體外免疫活性在脫色后得到
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