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文檔簡介
1、本實驗室分離到一株絲狀真菌Mars,經鑒定Mars菌株屬于白僵菌屬中的球孢白僵菌。前期實驗發(fā)現Mars菌株在牛奶培養(yǎng)基中培養(yǎng)后,可使培養(yǎng)基中出現紫紅色物質。本實驗研究了球孢白僵菌Mars菌株形成紫紅色物質的培養(yǎng)基以及培養(yǎng)條件,并對這種紫紅色物質進行了初步的分離和穩(wěn)定性研究。
分別用查氏固體培養(yǎng)基、馬鈴薯瓊脂葡萄糖固體培養(yǎng)基、牛乳固體培養(yǎng)基培養(yǎng)Mars菌株。28℃培養(yǎng)15d后,發(fā)現沒有紫紅色物質產生。Mars菌株再分別于查氏液體
2、培養(yǎng)基、馬鈴薯瓊脂葡萄糖液體培養(yǎng)基、牛乳液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),28℃培養(yǎng)15d后,發(fā)現只有在牛乳液體培養(yǎng)基中才有紫紅色物質產生。球孢白僵菌標準菌株3.4428在牛乳液體培養(yǎng)基中28℃培養(yǎng)15d后,發(fā)現沒有紫紅色物質產生。結果表明:在本實驗所選擇的培養(yǎng)基范圍內,牛乳液體培養(yǎng)基是唯一的能使球孢白僵菌Mars菌株產生紫紅色物質的培養(yǎng)基。
分別測定了球孢白僵菌Mars菌株發(fā)酵牛奶產生紫紅色物質的最佳溫度和pH值。將球孢白僵菌Mars分別放
3、在18℃、23℃、28℃、33℃和38℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每隔5d觀察并記錄Mars菌株在不同溫度下的生長和產生紫紅色物質的情況。再用1 mol/LNaOH溶液和乳酸調節(jié)牛乳液體培養(yǎng)基pH為5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5,接種后放在28℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每隔5d觀察并記錄Mars菌株在不同pH條件下的生長和產生紫紅色物質的情況。結果表明:28℃為Mars菌株發(fā)酵牛奶產生紫紅色物質的最佳溫度,pH在6.0-7.0的范
4、圍內Mars菌株能夠產生大量的紫紅色物質。
實驗使用有機溶劑萃取法對球孢白僵菌Mars發(fā)酵牛奶產生的紫紅色物質進行了初步分離純化。將牛乳發(fā)酵液進行離心處理后,用不同萃取劑對沉淀進行萃取,最后用紫外分光光度計進行掃描,結果表明:沉淀萃取液在330nm左右有吸收峰且丙酮為最佳萃取劑;上清液在500nm左右有吸收峰。
初步研究了Mars菌株產生的紫紅色物質的穩(wěn)定性。取沉淀萃取液和上清液,分別放于25℃、40℃、60℃、80
5、℃的恒溫水浴中2h,用分光光度計在其最大吸收波長處測定吸光度。取上清液并將pH值調到2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13,放置12h,用分光光度計在其最大吸收波長處測定吸光度。取沉淀萃取液和上清液,分別放在日光燈、室內自然光和黑暗處,每隔一定時間測定吸光度。結果表明:沉淀色素和上清色素在25℃~80℃溫度范圍內吸光度值幾乎沒有變化,色素比較穩(wěn)定;酸性條件下上清色素較穩(wěn)定,而堿性條件下上清色素不穩(wěn)定。黑暗處和室內自然光對
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