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文檔簡介
1、膠原多肽是由膠原蛋白或明膠酶解得到的多肽混合物,由于膠原多肽有著優(yōu)良的營養(yǎng)特性和生理活性,因此在食品行業(yè)和化妝品行業(yè)有著廣泛的應(yīng)用前景。在化妝品中,多肽分子量是影響生物活性的最重要的因素,以往用膠原蛋白酶解制備膠原小分子多肽:酶解產(chǎn)物分子量分布較廣、大分子膠原多肽含量較高,束縛了膠原多肽在化妝品中的應(yīng)用。本論文采用多酶復(fù)合酶解法,對(duì)明膠進(jìn)行酶解,極大的提高了酶解效率,解決了小分子膠原多肽得率低,酶解分子量分布不集中等問題。
本
2、論文以明膠為研究對(duì)象,采用三步復(fù)合酶解法制備分子量主要在1000 Da以下的小分子活性多肽。用單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)膠原多肽水解工藝進(jìn)行優(yōu)化,并測定了明膠和水解膠原多肽的基本組成成分。研究其清除自由基的能力,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn),最終確定小分子膠原多肽的抗氧化特性。本文的研究內(nèi)容體現(xiàn)在以下幾方面:
1.采用堿性蛋白酶→高溫中性蛋白酶→酸性蛋白酶三步酶解明膠,在組合酶的最佳工藝條件下,總水解率可達(dá)35.16%。
2.采用凝膠
3、柱層析法對(duì)膠原多肽水解物的分子量分布進(jìn)行測定,結(jié)果表明最優(yōu)酶組合水解膠原多肽的分子量主要分布為1000 Da以下,占整個(gè)洗脫峰面積的74.4%,而且分子量為5000 Da以上的多肽只占5.22%。
3.通過對(duì)膠原多肽水解物清除DPPH·自由基和羥基自由基(·OH)的試驗(yàn)表明,該多肽清除DPPH·自由基及羥基自由基的作用隨濃度的增大而增強(qiáng),呈量效關(guān)系。膠原多肽濃度為12 mg/mL時(shí),DPPH·自由基清除率達(dá)78.71%;濃度為
4、40 mg/mL時(shí),·OH清除率達(dá)89.12%,半清除濃度HSC5o為13.25 mg/mL。
4.通過D-半乳糖致小鼠衰老模型,研究膠原多肽水解物對(duì)氧化損傷模型小鼠的抗氧化作用。結(jié)果表明,膠原多肽可顯著降低氧化損傷模型小鼠血清中MDA含量、肝臟中LF含量;顯著增加血清和肝臟中GSH-Px活力;顯著提高小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)(P<0.05,P<0.01)。
5.通過中波紫外線(UVB,280-320nm)和長波紫外線(
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