1、生物技術藥物主要有蛋白類藥物和基因治療藥物，這類藥物分子量大，生物膜通透性差，在體內(nèi)易受酶的降解而導致生物利用度很低，使其應用受到很大的限制，而陽離子脂質體作為生物技術藥物載體具有高效、低毒、穩(wěn)定等優(yōu)點受到廣泛關注。
　　 本研究采用聚甲基丙烯酸酯季銨鹽修飾脂質體制備聚丙烯酸酯脂質體復合微粒（RL-LP），考察制備工藝和理化性質，測定RL-LP對牛血清白蛋白（BSA）和存活素反義寡核苷酸（ASON）的結合效率，研究其對這兩種藥物

2、進入細胞的促進作用，并對細胞作用機制進行初步評價。
　　 本文首先采用溶劑-非溶劑法制備RL-LP，分別考察溫度、脂質醇溶液滴加速度、RL/LP質量比對粒徑和Zeta的影響，確定制備工藝為溫度55℃、RL/LP質量比1:1、脂質醇溶液直接注入。電鏡觀察RL-LP形態(tài)規(guī)整，幾乎呈球形，與同法制備的空白LP相比，RL-LP粒徑與聚分散指數(shù)變小，Zeta電位增大，穩(wěn)定常數(shù)變小。紅外吸收光譜顯示RL-LP較單獨RL和LP，沒有特征峰的出

3、現(xiàn)或消失，說明RL與LP之間主要是通過疏水鍵等次級鍵的作用結合的。體外細胞毒性表明，RL-LP在HepG2、COS-7、L929腫瘤細胞中的毒性均低于單獨使用RL時的毒性。
　　 其次，本文考察RL-LP作為BSA載體的性能。用異硫氰酸熒光素（FITC）標記BSA，制得1分子BSA結合2.34分子FITC的FITC-BSA。采用氯化鈣沉淀法考察RL-LP和BSA的結合率，結果顯示RL-LP與BSA的質量比為10:1時，兩者的結合

4、率達98.6％。熒光顯微鏡下觀察RL-LP/FITC-BSA的細胞攝取，發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)熒光廣泛分布，而游離FITC-BSA則只有微弱的熒光，表明RL-LP對BSA進入細胞有明顯促進作用。
　　 最后，本文以ASON為模型，考察RL-LP作為基因載體的可行性。采用直接混合孵育制備RL-LP/ASON復合物，瓊脂糖電泳測定RL-LP與ASON的結合率，結果顯示，當N/P比超過4:1時，兩者完全結合。細胞攝取實驗表明，RL-LP/ASON

5、在不同細胞中的攝取行為表現(xiàn)出較大的差異，在COS-7細胞中，胞內(nèi)熒光總量隨著RL-LP濃度的增加而增加，而在HepG2細胞中，胞內(nèi)熒光總量隨著RL-LP濃度的增加呈現(xiàn)出先增加后減小的趨勢，當N/P比為4:1時，胞內(nèi)熒光總量最大。細胞攝取動力學研究表明，當RL-LP/ASON復合物與細胞共培養(yǎng)4h時，細胞攝取達到平衡。本文還研究了溫度、血清、RL-LP預處理和共培養(yǎng)對復合微粒細胞攝取行為的影響。結果發(fā)現(xiàn)，4℃時RL-LP/ASON的攝取量