1、常規(guī)的蛋白質(zhì)化學(xué)修飾過程操作步驟多、周期長、修飾位點(diǎn)相對(duì)隨機(jī)，容易引起蛋白質(zhì)的變性失活。本課題提出了蛋白質(zhì)分離過程和化學(xué)修飾過程的耦合技術(shù)，能夠簡化原來的生產(chǎn)操作步驟，縮短操作時(shí)間，從而減少蛋白活性的損失，降低投資成本和生產(chǎn)費(fèi)用。
　　 本課題選擇超氧化物歧化酶作為模型蛋白，選擇Q Sepharose FastFlow作為固相分離介質(zhì)，選擇單甲氧基聚乙二醇5000作為修飾劑，分別對(duì)超氧化物歧化酶的吸附條件，分離-化學(xué)修飾耦合過程

2、的修飾條件以及分離-化學(xué)修飾耦合過程洗脫條件進(jìn)行了優(yōu)化，并對(duì)修飾后超氧化物歧化酶的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。
　　 第二章對(duì)超氧化物歧化酶吸附條件進(jìn)行了考察，優(yōu)化出QSepharose Fast Flow吸附超氧化物歧化酶的最佳條件是：時(shí)間為30min，pH值為9.0，SOD濃度為3.0mg/ml，溫度為室溫，最佳吸附條件下吸附量約為22.5mg/ml。
　　 第三章對(duì)超氧化物歧化酶分離-化學(xué)修飾耦合過程的修飾條件和洗脫條件進(jìn)行

3、了考察，優(yōu)化出耦合過程的最佳修飾條件是：修飾時(shí)間為270min，修飾緩沖液濃度為40mmol/L，mPEG-5000與SOD摩爾比為50:1，修飾pH為9.0，修飾溫度為室溫；優(yōu)化出超氧化物歧化酶分離-化學(xué)修飾耦合過程較好的洗脫方式有兩種：洗脫方式1是NaCl濃度梯度洗脫（0-1.0mol/L），洗脫方式2是0.15mol/LNaCl洗脫+NaCl濃度梯度洗脫（0.15-0.6mol/L）。
　　 第四章對(duì)修飾后SOD的熱穩(wěn)定性