1、目的： 高血糖影響卒中死亡率和神經功能恢復。本研究建立糖尿病大鼠合并急性腦缺血再灌注動物模型；探討肢體缺血后處理（I-PostC）誘導的遠隔器官缺血后處理（RPostC）對糖尿病大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷神經功能障礙、腦梗死體積及細胞凋亡、線粒體超微結構和功能的影響；探討RPostC對糖尿病合并急性腦缺血的保護機制。 方法： （1）采用空腹腹腔內注射鏈脲霉素（streptozotocin，STZ）建立實驗性糖尿病大

2、鼠模型，在此基礎上采用線栓法閉塞大腦中動脈（MCAO）建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。造模成功的60只雄性SD大鼠分為4組：空白對照組；假手術組；缺血再灌注組（I/R組）；肢體缺血后處理（RPostC組）。 （2）肢體缺血后處理方法：缺血90 min再灌注6h，同時捆綁雙下肢5 min，以不能觸及股動脈搏動為準，松開5 min，反復3次，恢復灌注。 （3）再灌注6h后采用Longa評分標準對各組大鼠進行神經功能障礙評分（ne

3、urologic deficit scores，NDS）。斷頭取腦采用TTC染色法測定腦梗死體積；HE染色光鏡下觀察缺血腦組織病理變化；TUNEL標記觀察神經細胞凋亡的變化；透射電鏡下觀察線粒體超微結構；試劑盒測定線粒體丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、Na+，K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和GSH-Px含量。 （4）實驗數據以均數±標準差（x±s）表示，采用SPSS11.0統(tǒng)計分析軟件，組間比較采用單因素方差分析（

4、ANOVA），方差分析差異有統(tǒng)計學意義時，進一步用SNK-q檢驗及Dunnett-t檢驗作兩兩比較。神經行為學評分以中位數表示，組間比較采用秩和檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結果： （1）一般觀察及神經功能障礙評分比較糖尿病大鼠血糖明顯增高，達到糖尿病診斷標準，且有多飲、多食、多尿及消瘦等表現。與空白對照組和假手術組相比，I/R組和RPostC組均表現為不同程度的神經功能缺損，NDS明顯升高。與I/R組比較，RP

5、ostC組NDS差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 （2）各組大鼠腦梗死體積比較（TTC染色）梗死區(qū)呈蒼白色且與大腦中動脈供血分布區(qū)一致。與空白對照組和假手術組相比，I/R組和RPostC組腦梗死體積百分比明顯升高（P<0.01）。與I/R組比較，RPostC組梗死體積百分比降低（P<0.05）。 （3）各組大鼠光鏡觀察結果對照組和假手術組大鼠大部分細胞邊界清楚，核形狀規(guī)則，少數細胞出現核染色變深，胞漿部分消失等變性的表現。

6、I/R組神經元大量丟失，大部分細胞出現胞漿固縮，核固縮、碎裂。RPostC組上述病理改變明顯好轉，少數神經元出現缺血、脫失及胞漿固縮。 （4）各組大鼠凋亡細胞比較（TUNEL法）凋亡細胞的細胞體積明顯縮小，細胞核固縮，染色質濃縮、邊聚?？瞻讓φ战M及假手術組可見稀少散在分布凋亡神經元，I/R組凋亡細胞數明顯增加。與I/R組相比，RPostC組凋亡細胞數明顯減少（P<0.01）。 （5）各組大鼠線粒體超微結構比較空白對照組和假手

7、術組可見基本正常的線粒體，間隙腫脹，但膜的結構尚完整。I/R組多數線粒體基質消失，結構破壞，重者線粒體明顯空泡化，伴內外膜的崩解。RPostC組少數線粒體有空泡，結構較完整線粒體損傷較I/R組明顯減輕。 （6）各組大鼠線粒體MDA、SOD、ATP酶、GSH-PX比較I/R組和RPostC組線粒體MDA活性均較空白對照組和假手術組明顯升高，SOD、Na+，K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和GSH-Px活性均明顯降低（P<0.05或

8、0.01）。與I/R組比較，RPostC組線粒體MDA活性明顯降低，SOD、Na+，K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和GSH-Px活性升高（P<0.05或0.01）。 結論： （1）肢體I-PostC可以減輕遠隔器官腦的I/R損傷，從而證實了一種與缺血后處理相似的腦保護機制，即RPostC。 （2）肢體I-PostC誘導的RPostC可以減少糖尿病大鼠腦局灶性腦缺血再灌注損傷的腦梗死體積和神經細胞凋亡，減輕糖尿病大

9、鼠腦組織和線粒體病理損傷程度。 （3）RPostC可以降低脂質過氧化產物MDA活性，增加SOD、Na+，K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和GSH-Px活性，增強線粒體清除氧自由基的能力，減少脂質過氧化物的生成，維持線粒體結構及功能的完整，從而在亞細胞水平上發(fā)揮其缺血再灌注腦損傷的保護作用。 （4）本實驗RPostC對神經行為學未見明顯改善，尚需深入研究RPostC的最佳方案，使其減輕腦I/R損傷的病理損害的同時改善腦功能。