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文檔簡介
1、目的:吉蘭-巴雷綜合征(Guillain-Barre Syndrome,GBS)是一種自身免疫性疾病,目前病因和發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚。實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性神經(jīng)炎(Experimental Allergic Neuritis,EAN)是由CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的急性多發(fā)性炎癥性神經(jīng)根脫髓鞘性疾病,是研究GBS的理想動(dòng)物模型。GBS和EAN的發(fā)病都與機(jī)體免疫耐受機(jī)制被打破,產(chǎn)生自身免疫性T細(xì)胞有關(guān)。B、T淋巴細(xì)胞弱化因子(B and T lymph
2、ocyte attenuator,BTLA)是最近發(fā)現(xiàn)的一種抑制性協(xié)同刺激因子,結(jié)合其配體后可介導(dǎo)抑制性信號(hào),抑制T細(xì)胞的活化。Cbl-b(casitas B-lineage lymphoma b)是一種反向調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化的泛素連接酶,通過誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫無能,維持免疫耐受、免疫活化和自身免疫三者之間的平衡。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察BTLA及Cbl-b mRNA在EAN大鼠坐骨神經(jīng)、脾臟、外周血及淋巴結(jié)中的動(dòng)態(tài)表達(dá),探討B(tài)TLA及Cbl-b與EAN
3、的發(fā)病關(guān)系,為治療自身免疫性疾病提供新的靶點(diǎn)。 方法:72只Lewis大鼠,SPF級(jí),雄性,6-8周,體重160-180克,隨機(jī)分為生理鹽水對照組(NS組)、完全弗氏佐劑組(CFA組)及抗原注射組(EAN組)。NS組第0天于雙后肢足墊皮內(nèi)注射200μl生理鹽水,CFA組第0天于雙后肢足墊皮內(nèi)注射200μl完全弗氏佐劑,EAN組第0天雙后肢足墊皮內(nèi)注射200μl抗原乳劑(含100μg P253-78aa肽段的0.1M PBS100
4、μl和CFA100μl用針式混勻器混合乳化)。觀察免疫后大鼠的發(fā)病情況和組織病理學(xué)改變。分別在第7天、第16天、第24天、第33天處死動(dòng)物,取坐骨神經(jīng)根制作病理切片行HE染色和Weil's染色觀察其病理改變,利用RT-PCR檢測坐骨神經(jīng)、脾臟、外周血和淋巴結(jié),Cbl-b mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果:EAN組大鼠在發(fā)病16天癥狀達(dá)高峰,第33天基本好轉(zhuǎn)。與對照組相比,EAN組大鼠各組織各時(shí)間點(diǎn)BTLA mRNA表達(dá)均增高(P<0.
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