1、隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)和城市化的發(fā)展，城市污水的排放量也逐年加大，成分構(gòu)成非常復(fù)雜，盡管?chē)?guó)家制定了一系列的污水排放標(biāo)準(zhǔn)并建立了諸多綜合污水處理廠，但現(xiàn)有的水質(zhì)污染綜合指標(biāo)尚不能很好地反映污水對(duì)水生物的毒害作用，特別是遺傳毒性。由于許多化合物缺乏毒性數(shù)據(jù)，更無(wú)法預(yù)測(cè)污水中復(fù)雜的有毒化合物的相互或協(xié)同作用對(duì)水生生物產(chǎn)生的毒害而影響水環(huán)境的生態(tài)平衡，進(jìn)而對(duì)人類(lèi)的健康產(chǎn)生的潛在的危害。因此，忽視排放污水的綜合毒性，無(wú)疑會(huì)帶來(lái)極大的隱患[1]。 目

2、的：傳統(tǒng)的Ames實(shí)驗(yàn)、體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)、單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)已廣泛用于化學(xué)品毒性的監(jiān)測(cè)，但用于綜合評(píng)價(jià)化學(xué)品的遺傳學(xué)毒性還不夠完善。經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(OECD)在1996年將斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育技術(shù)列入測(cè)定單一化學(xué)品毒性的標(biāo)準(zhǔn)方法之一[2]，該技術(shù)可用于化學(xué)品遺傳學(xué)毒性的評(píng)價(jià)，尤其用于生態(tài)環(huán)境乃至對(duì)人類(lèi)安全產(chǎn)生影響的化學(xué)物質(zhì)的毒性和致畸性的測(cè)定。該項(xiàng)技術(shù)已引起我國(guó)學(xué)者的關(guān)注，朱琳、史淑潔[3]的斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育技術(shù)在毒性評(píng)價(jià)中的

3、應(yīng)用一文闡述了這一技術(shù)的應(yīng)用現(xiàn)狀、優(yōu)越性及發(fā)展前景。利用斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育技術(shù)結(jié)合傳統(tǒng)的毒性監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)用于污水毒性監(jiān)測(cè)方面的研究具有重要實(shí)際意義。 方法：本研究通過(guò)Ames實(shí)驗(yàn)、體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)、單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)和斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育技術(shù)來(lái)檢測(cè)環(huán)磷酰胺、絲裂霉素和疊氮化鈉這三種已知具有遺傳毒性的物質(zhì)來(lái)驗(yàn)證這一系統(tǒng)的可行性，由于環(huán)磷酰胺、絲裂霉素和疊氮化鈉是Ames實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性物，而環(huán)磷酰胺和絲裂霉素又是體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸

4、變實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性物，故用體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)檢測(cè)疊氮化鈉的致畸性，用單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)和斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育技術(shù)來(lái)檢測(cè)環(huán)磷酰胺、絲裂霉素和疊氮化鈉這三種物質(zhì)的遺傳毒性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)疊氮化鈉在18.75μg/mL劑量時(shí)就可以使染色體發(fā)生畸變，在56μg/mL劑量時(shí)對(duì)斑馬魚(yú)胚胎產(chǎn)生致畸作用，環(huán)磷酰胺和絲裂霉素對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育48h心率有顯著的影響，隨劑量的增加，心率減慢?？梢?jiàn)這一污水毒性監(jiān)測(cè)的安全評(píng)價(jià)程序是可行的。 在上述實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，

5、為考察水體毒性監(jiān)測(cè)安全評(píng)價(jià)程序的實(shí)用性，利用該系統(tǒng)檢測(cè)A污水處理廠原水、曝氣池水、經(jīng)處理后的出水、B洗浴中心廢水及C醫(yī)院醫(yī)療廢物蒸汽滅菌裝置冷凝液的毒性。各水樣原濃度設(shè)為1，其余劑量組濃度分別稀釋為1/2、1/4、1/5、1/6；環(huán)磷酰胺各劑量組濃度分別設(shè)為5000μg/mL、4000μg/mL、3000μg/mL、2000μg/mL、1000μg/mL、100μg/mL；絲裂霉素各劑量組濃度分別設(shè)為5000μg/mL、4000μg/m

6、L、3000μg/mL、2000μg/mL、1000μg/mL、100μg/mL；疊氮化鈉各劑量組濃度分別設(shè)為1800μg/mL、1000μg/mL、560μg/mL、180μg/mL、100μg/mL、56μg/mL、10μg/mL。 結(jié)果：研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Ames實(shí)驗(yàn)中，A污水處理廠原水、曝氣池水100μL/皿、50μL/皿、25μL/皿、12.5μL/皿各劑量組均有致突變性；體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)證明A污水處理廠原水

7、、曝氣池水1/2、1/4、1/5、1/6各劑量組均可造成CHO細(xì)胞染色體畸變；單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)證明A污水處理廠原水、曝氣池水的1/2劑量組對(duì)CHO細(xì)胞DNA有明顯的損傷作用；斑馬魚(yú)胚胎毒性監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，從胚胎發(fā)育第8小時(shí)、A污水處理廠原水稀釋0.53倍、曝氣池水稀釋0.66倍劑量開(kāi)始對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育有明顯的致畸性；而B(niǎo)洗浴中心廢水及C醫(yī)院醫(yī)療廢物蒸汽滅菌裝置冷凝液的Ames實(shí)驗(yàn)、體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)、單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)和斑馬魚(yú)胚