1、本論文以安琪酵母股份有限公司有代表性的釀酒酵母屬中24株釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)及相關(guān)3種子囊菌酵母為研究對(duì)象，通過對(duì)所選取酵母菌株的核糖體DNA(rDNA)ITS-1序列進(jìn)行電泳和克隆測(cè)序，分析出它們之間的系統(tǒng)學(xué)關(guān)系。研究表明，以酵母菌株的rDNAITS-1序列進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，能把菌株分類鑒定到屬的水平；采用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳能把部分釀酒酵母菌株分類鑒定到種的水平，區(qū)別效果較瓊脂糖凝膠電泳有

2、所提高；對(duì)rDNAITS-1序列進(jìn)行克隆、測(cè)序，經(jīng)序列比對(duì)后發(fā)現(xiàn)，釀酒酵母屬中釀酒酵母菌株的ITS-1序列大多數(shù)有差異，差異主要表現(xiàn)在ITS-1序列上游的一段Poly-T堿基上，其它處的差異僅是個(gè)別堿基的轉(zhuǎn)換或顛換，ITS-1序列長(zhǎng)度分布在360-370bp之間，G+C％含量均在35.3％左右。所有序列不同的菌株的ITS-1序列在GenBank上發(fā)布，并在NCBI上做BLUST比較，最后鑒定出一株酵母菌不屬于釀酒酵母，結(jié)合序列比對(duì)和進(jìn)化

3、樹分析，確認(rèn)它屬于葡萄汁酵母(Saccharomycesuvarum)。根據(jù)釀酒酵母ITS-1序列的不同，用ClustalX1.8、Phylip3.6等生物軟件做進(jìn)化樹分析和系統(tǒng)分類學(xué)研究，最后確定了各菌株之間的親緣關(guān)系遠(yuǎn)近。實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證明ITS-1序列分析方法在酵母公司生產(chǎn)酵母及其發(fā)酵生產(chǎn)過程中的應(yīng)用可行性及其重要作用。 用形態(tài)特征觀察和生理生化測(cè)定等常規(guī)分類學(xué)方法進(jìn)行酵母菌株的分類鑒定，一般只能分類到屬的水平，而且花費(fèi)的周期