1、ε—聚賴氨酸(ε—polylysine，ε—PL)是80年代由日本首先發(fā)現(xiàn)由微生物發(fā)酵產(chǎn)生的一種新型食品抑菌劑，其化學組成是由人體必需氨基酸L—賴氨酸構(gòu)成的多肽，它經(jīng)消化后又可變成單一的賴氨酸而成為人體營養(yǎng)的強化劑，已作為GRAS物質(zhì)通過了美國FDA認證，CAS登記號為28211—04-3，標志著ε—聚賴氨酸已被國際標準所認可。故聚賴氨酸作為食品防腐劑，具有無毒副作用，安全性高的特點。 本課題對實驗室保存的一株具有ε—聚賴氨酸生

2、產(chǎn)能力菌株白色鏈霉菌StreptomycesalbulusSA進行研究，通過對其分泌產(chǎn)物與帶電染料的靜電作用及Dragendorff試劑反應和產(chǎn)物的氨基酸組成分析可以得出，ε—聚賴氨酸帶正電荷，是一種生物堿物質(zhì)并且為L—賴氨酸的聚合物。通過以上實驗，為篩選和驗證具有ε—聚賴氨酸生產(chǎn)能力的菌株提供了簡便而快捷的方法。 對白色鏈霉菌StreptomycesalbulusSA進行誘變選育，首先研究了紫外線復合氯化鋰誘變中不同的照射劑量

3、對細胞存活率的影響得到了致死率曲線，根據(jù)遺傳育種的經(jīng)驗，正向突變較多發(fā)生在偏低劑量中，確定了以25s作為最適紫外誘變劑量。初篩采用打孔瓊脂柱抑菌圈法可以大批量并快速選出抑菌效果顯著的菌株，經(jīng)過復篩得到一株產(chǎn)量為1.33gA，的突變株UL2-7，產(chǎn)量提高了27.9％。 以紫外誘變獲得的突變株UL2-7作為出發(fā)菌株，進行亞硝酸誘變篩選AEC抗性菌株，根據(jù)誘變劑量對細胞存活率的影響得到了致死率曲線，確定20min的處理時間作為最適亞硝

4、酸誘變劑量。通過復篩得到高產(chǎn)菌株UN2-71，ε—聚賴氨酸產(chǎn)量為1.64g/L，提高了57.7％。 對誘變得到的菌株UN2-71進行發(fā)酵穩(wěn)定性能研究，經(jīng)過5次傳代實驗結(jié)果表明突變株性狀穩(wěn)定，并對白色鏈霉菌UN2-71的培養(yǎng)特性及生理生化特性進行了觀察。 對不同碳源和氮源對ε—聚賴氨酸產(chǎn)量的影響進行了研究，得到可溶性淀粉是最佳碳源，而(NH)2SO4和酵母提取物的組合是最佳氮源。在碳源、氮源優(yōu)化的基礎上，進行搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基

5、的優(yōu)化，對培養(yǎng)基八種成分可溶性淀粉、硫酸銨、酵母提取物、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、ZnSO4·7H2O、FeSO4·7H2O進行了Plackett—Burman篩選試驗，得到可溶性淀粉、硫酸銨和酵母提取物為顯著影響因素，對這三因子進行三水平的Box—Behnken試驗，通過RSM分析得到優(yōu)化模型，優(yōu)化后的培養(yǎng)基組成為：可溶性淀粉40g、硫酸銨8g、酵母提取物6.4557g、K2HPO40.8g、KH2PO41.3