1、目的:膠質瘤是神經系統(tǒng)最常見的原發(fā)腫瘤。目前，其治療方法主要有手術、放療及化療，但總體療效并不理想。腫瘤免疫治療是一種特異性更強、副作用更小的腫瘤治療方式，其關鍵是確定理想的免疫治療靶點。黑色素瘤抗原基因(melanoma associated antigen gene，MAGE)是癌-睪丸抗原(cancer testis antigen，CTA)中的一員，其表達特點是在多種腫瘤組織中有表達，而在正常組織僅表達于睪丸生殖細胞和胎盤組織，

2、故可作為腫瘤免疫治療的理想靶點。MAGE-A4是MAGE家族的一個成員，其在一些腫瘤中的表達及意義已進行了初步研究，但是關于MAGE-A4在腦膠質瘤中的表達情況未見報道。本研究旨在觀察MAGE-A4 mRNA在正常腦組織、正常睪丸組織及腦膠質瘤中的表達情況，探討腦膠質瘤患者MAGE-A4作為臨床免疫治療靶點的可能及MAGE-A4 mRNA表達與臨床參數的關系。
　　方法:收集腦膠質瘤住院患者且接受手術治療的病例78例，標本均來自于

3、河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院神經外科2009年2月～2012年2月標本。年齡在15～75歲之間，中位年齡45歲，其中男性40例，女性38例。在手術前由有經驗的神經科醫(yī)師對病人進行功能狀態(tài)KPS評分（Karnofsky評分）。KPS評分標準是由美國東部腫瘤協(xié)作組提出，該評分可依據患者活動情況、病情程度、生活自理程度，對患者機體活動狀態(tài)進行評價，10分一個等級對患者進行評分，滿分為100分。KPS評分80分及以上的患者具有獨立生存能力，評分在50至

4、70分的患者生活需要部分照顧。為確定腫瘤大小根據患者術前頭顱CT、MRI測量腫瘤最大直徑。手術中取出標本后立即置入液氮罐中并迅速轉運到-80℃冰箱保存。術后病理證實均為腦膠質瘤且術前未接受手術、放療和化療。根據WHO2000對膠質瘤組織進行病理分級:包括Ⅰ級11例，Ⅱ級26例，Ⅲ級27例，Ⅳ級14例。將Ⅰ～Ⅱ級膠質瘤稱為低級別膠質瘤，Ⅱ～Ⅳ級膠質瘤歸為高級別膠質瘤。術后通過電話，郵件或復診的方式，隨訪患者1、3、5年的生存情況。本次研究

5、采用逆轉錄聚合酶鏈反應(reverse transcription polymerase chainreaction，RT-PCR)技術從轉錄水平上檢測78例腦膠質瘤中MAGE-A4的表達，并以7例正常睪丸組織（均為前列腺癌去勢手術患者的睪丸組織）作為陽性對照，12例正常腦組織（均為車禍死亡患者捐獻或去骨瓣減壓中去除的腦組織）作為陰性對照?；仡櫺苑治鯩AGE-A4基因表達與膠質瘤患者臨床參數（包括年齡、性別、腫瘤大小、術前KPS評分、病

6、理級別）的關系。總生存期是指手術之日起到患者死亡的時間。采用Kaplan-Meier統(tǒng)計方法分析MAGE-A4 mRNA的表達及臨床參數與膠質瘤患者總生存期的關系。進一步對病理分級及KPS評分進行多因素分析。
　　結果:
　　1.MAGE-A4 mRNA在正常睪丸組織、正常腦組織及膠質瘤組織中的表達7例正常睪丸組織中均發(fā)現MAGE-A4 mRNA表達，陽性率為100％。而在12例正常腦組織中均無MAGE-A4 mRNA的表達

7、，陽性率0％。78例腦膠質瘤組織中有37例MAGE-A4基因表達陽性，陽性率為47.44％。MAGE-A4在膠質瘤中的表達與正常腦組織相比有統(tǒng)計學差異(x2=9.666，P=0.002)。
　　2.MAGE-A4 mRNA的表達與腦膠質瘤患者臨床參數的關系
　　2.1 MAGE-A4 mRNA的表達與性別的關系40例男性病例中，有20例MAGE-A4 mRNA表達陽性，陽性率為50.00％;而38例女性中，有17例MAGE-

8、A4 mRNA表達陽性，陽性率為44.74％。經統(tǒng)計學分析，兩者之間的比較未見統(tǒng)計學差異(x2=0.216，P=0.642)。
　　2.2 MAGE-A4 mRNA的表達與年齡的關系。
　　50歲以下的腦膠質瘤病例共有47例，有26例MAGE-A4 mRNA表達陽性，陽性率為55.32％;50歲及以上的病例共有31例，有12例MAGE-A4 mRNA表達陽性，陽性率為38.71％。兩者之間進行比較未見統(tǒng)計學差異（x2=2.0

9、63，P=0.151）。
　　2.3 MAGE-A4 mRNA的表達與KPS評分的關系。
　　對每位患者MAGE-A4 mRNA表達情況及術前的KPS評分進行統(tǒng)計分析，70分以下共有42例，其中22例MAGE-A4 mRNA表達陽性，陽性率為52.38％;70分以上共36例，其中15例MAGE-A4 mRNA表達陽性，陽性率為41.67％。兩者之間的比較未見統(tǒng)計學差異(x2=0.892，P=0.345)。
　　2.4

10、MAGE-A4 mRNA的表達與腫瘤大小的關系。
　　將腫瘤最大直徑進行比較，5cm以下的病例共有20例，其中有11例MAGE-A4 mRNA表達陽性，陽性率55.00％，5cm及以上病例共有58例，其中26例表達陽性，陽性率為44.83％。兩者之間進行統(tǒng)計學分析未見統(tǒng)計學差異（x2=0.617，P=0.432）。
　　2.5 MAGE-A4 mRNA的表達與病理分級的關系。
　　根據病理結果，78例標本中，低級別腦膠

11、質瘤（Ⅰ～Ⅱ級）共37例，其中12例MAGE-A4 mRNA表達陽性，陽性率為32.43％;高級別腦膠質瘤（Ⅲ～Ⅳ級）共41例，其中25例MAGE-A4 mRNA表達陽性，陽性率為60.98％。統(tǒng)計學分析表明兩者有顯著的統(tǒng)計學差異(x2=6.355，P=0.012)。
　　3.MAGE-A4 mRNA在腦膠質瘤中的表達與患者臨床預后之間的關系MAGE-A4表達陽性組共37例，中位生存期為24個月，其中總生存期達1年者占77.7％，

12、3年者占37.3％，5年者占9.3％;MAGE-A4表達陰性組共41例，中位生存期為20個月，其中總生存期達1年者占85.2％，3年者占36.7％，5年者占9.5％。用Kaplan-Meier法對MAGE-A4陽性表達組總生存期與陰性表達組總生存期進行分析發(fā)現兩者未見顯著的統(tǒng)計學差異（x2=0.007，P=0.935）。
　　4.臨床參數與膠質瘤患者預后之間的關系采用單因素分析結果表明臨床參數中的性別、年齡、腫瘤大小均與膠質瘤患者

13、的預后無關，而與病理級別相關（P=0.000）;與KPS評分相關(P=0.013)。進一步通過多因素分析，與低級別膠質瘤（Ⅰ～Ⅱ級）相比，高級別膠質瘤（Ⅲ～Ⅳ級）的死亡風險要高3.175倍。術前KPS評分70分以下的死亡風險是70分及以上患者的2.045倍。
　　結論:
　　1.在正常腦組織中無MAGE-A4基因的表達，在正常睪丸組織中均有MAGE-A4基因表達。
　　2.在腦膠質瘤組織中，MAGE-A4有特異性表達，