1、本論文采用肝細胞的擬組織化凝膠包埋培養(yǎng)方式,主要從藥物代謝和藥物肝毒性兩個方面來研究其用于藥物篩選的可行性. 本論文首先考察了大鼠肝細胞凝膠包埋與作為對照培養(yǎng)模型的單層貼壁細胞的CYP1A2、CYP2B、CYP3A和Ⅱ相酶中GST的活性.通過比較,發(fā)現(xiàn)凝膠包埋細胞比單層貼壁培養(yǎng)細胞能更好地保持各項藥物代謝酶的活性. 其次,本文采用超低溫保存方法來解決肝細胞無法增殖的實際問題,通過觀察超低溫凍存后大鼠肝細胞在兩種培養(yǎng)模型下

2、的CYP1A2、CYP2B、CYP3A和Ⅱ相酶GST酶活表達情況,發(fā)現(xiàn)凍存細胞復蘇后仍在凝膠包埋培養(yǎng)中保持比平板貼壁細胞更好的酶活性. 本文還采用了大鼠肝細胞凝膠包埋這一培養(yǎng)模型系統(tǒng)研究了藥物他克寧(tacfine,THA)的毒性機理,并與傳統(tǒng)的單層貼壁培養(yǎng)比較,揭示了他克寧毒性與CYP1A2及GSH關系方面的新的發(fā)現(xiàn),有助于解決了一些由相互矛盾的文獻報道結果所引起的困惑. 最后,為了比較大鼠和人之間的種屬差異,更真實地