1、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-a，TNF-a)具有抑制和促進惡性腫瘤生長的雙重作用。一方面局部注射大劑量腫瘤壞死因子可以選擇性摧毀腫瘤血管，從而抑制腫瘤的生長；另一方面在腫瘤微環(huán)境中，炎癥細胞持續(xù)分泌的低濃度的腫瘤壞死因子可以促進血管的新生，從而有利于腫瘤侵襲和轉移。 血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)具有強大的促進腫瘤新生血管形成的作用

2、，TNF-a作為一種誘導VEGF表達的細胞因子，其內在機制尚未闡明。我們的研究是圍繞TNF-a如何上調乳腺癌細胞內VEGF的表達展開。 通過對VEGF的啟動子進行分析，我們發(fā)現其中包含著激活蛋白1(activator protein-1，AP-1)的結合位點。AP-1家族是一類重要的轉錄因子，在炎癥及腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的調節(jié)作用，它的上游是絲裂原激活的蛋白激酶家族(mitogen-activated protein k

3、inase，MAPK)。我們用TNF-a刺激人乳腺癌細胞MCF-7后，發(fā)現含AP-1結合序列的螢光素酶報告基因的活性增強。Western-blot實驗表明，此時AP-1家族成員c-Jun，c-Fos和JunB的表達上調，而其它成員如Fra-1，Fra-2和JunD的表達無明顯改變。借助于免疫共沉淀方法，我們進一步發(fā)現，活化的AP-1以p-c-Jun-c-Jun和p-c-Jun-JunB同源二聚體為主啟動轉錄。我們發(fā)現在信號通路的上游，T

4、NF-a的刺激明顯激活了MAPK通路中的c-Jun N末端激酶(the c-Jun N-terminal kinases，JNK)，而對其它兩條通路改變不明顯。接著，通過一系列的實驗證明，在MCF-7細胞內，TNF-a的刺激確實可以引起VEGF的表達上調，表現為TNF-a刺激后，含VEGF啟動子序列的螢光素酶報告基因的活性增強；RT-PCR和Western-blot的結果表明VEGFmRNA和蛋白表達水平均有增加。最后，采用染色質免疫沉