1、膽管癌是一類起源于膽管上皮細(xì)胞的惡性腫瘤,其發(fā)病率約占總的肝膽腫瘤的10％-15%,且逐年增高。由于在疾病早期階段缺乏特定的癥狀,大多數(shù)膽管癌患者確診時(shí)已是疾病的晚期,總體預(yù)后差,根治性切除能使患者獲得最佳療效,但術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)率高。microRNAs是一類非編碼的單鏈小分子RNA,能夠通過(guò)調(diào)節(jié)多種靶基因的表達(dá)來(lái)控制疾病的發(fā)生發(fā)展。研究結(jié)果亦表明,microRNA-21廣泛參與癌癥的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程,與多種腫瘤患者的臨床病理及預(yù)后有密

2、切的聯(lián)系。本研究應(yīng)用原位雜交檢測(cè)microRNA-21在膽管癌組織中的表達(dá),并用qRT-PCR檢測(cè)膽管癌組織中microRNA-21的表達(dá)以證實(shí)原位雜交的結(jié)果,分析其與臨床病理因素及患者預(yù)后的關(guān)系,同時(shí)探討microRNA-21對(duì)膽管癌中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)現(xiàn)象的調(diào)控的作用,以期為膽管癌的早期診斷和預(yù)后評(píng)估提供有參考價(jià)值的分子生物學(xué)指標(biāo)。
　　目的:研究microRNA-21及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)標(biāo)志物在膽管癌組織中的表達(dá)

3、及與臨床病理因素的關(guān)系,進(jìn)一步探討microRNA-21在膽管癌中與EMT的關(guān)系及其可能的機(jī)制。
　　方法:收集安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院2005年1月到2010年1月手術(shù)切除的41例膽管癌標(biāo)本,10例行膽管癌根治術(shù)患者的癌旁組織標(biāo)本,分別采用原位雜交和免疫組織化學(xué)法檢測(cè)microRNA-21、E-cadherin、N-cadherin等表達(dá),進(jìn)一步應(yīng)用qRT-PCR檢測(cè)膽管癌組織中microRNA-21的表達(dá)以證實(shí)原位雜交的結(jié)果,

4、同時(shí)探討microRNA-21對(duì)膽管癌中EMT的調(diào)控的作用及機(jī)制,分析microRNA-21的表達(dá)對(duì)臨床預(yù)后評(píng)估的價(jià)值。計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn),采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線,生存分析采用Log-rank檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:膽管癌組織中microRNA-21表達(dá)率為63.4%,高于癌旁組織的30.0%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);microRNA-21高表達(dá)與細(xì)胞分化程度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、是否發(fā)生神經(jīng)脈管浸潤(rùn)密切相關(guān)

5、(P<0.05),但與患者性別、年齡、腫瘤位置、病理類型無(wú)明顯相關(guān)(P>0.05)。qRT-PCR結(jié)果亦證實(shí)microRNA-21的表達(dá)與患者有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、是否發(fā)生神經(jīng)脈管浸潤(rùn)密切相關(guān)(P<0.05)。E-cadherin與N-cadherin等表達(dá)分別與有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、是否發(fā)生神經(jīng)脈管浸潤(rùn)相關(guān)(P<0.05),但與患者的性別、年齡、腫瘤位置、病理類型及分化程度無(wú)明顯相關(guān)(P>0.05)。同一批膽管癌組織中microRNA-21與上皮

6、間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)標(biāo)志蛋白E-cadherin、N-cadherin等表達(dá),具有相關(guān)性(r=0.373,0.614,6.617,0.264,P<0.05)。術(shù)后生存分析結(jié)果顯示,microRNA-21低表達(dá)患者總體生存率及無(wú)瘤生存率均高于microRNA-21高表達(dá)者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:microRNA-21在膽管癌組織中高表達(dá),其可能是通過(guò)誘導(dǎo)EMT的發(fā)生來(lái)促進(jìn)膽管癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移,且其有望作為一種預(yù)后指標(biāo)應(yīng)