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文檔簡介
1、目的:研究單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)誘導人臍靜脈內皮細胞凋亡的途徑。方法:1.培養(yǎng)并鑒定人臍靜脈內皮細胞;2.不同濃度的MCP-1(0.1ng/mL,1.0ng/mL,10ng/mL,100ng/mL)作用hVECs48h后,NAO染色流式細胞術檢測線粒體質量;流式細胞術檢測細胞色素C(Cyt C)含量變化;Western blot檢測Caspase-9蛋白的表達;3.用不同濃度MCP-1(0.1ng/mL,1.0ng/mL,1
2、0ng/mL,100ng/mL)作用細胞48h,Real-time PCR檢測細胞P53mRNA表達量;Westernblot檢測p53蛋白的表達;用不同劑量(10μ mol/L,20μ mol/L,30μ mol/L)的P53阻斷劑PFT-α預處理細胞后,再用10ng/mL的MCP-1誘導hVECs,AnnexinV-FITC/PI雙染細胞流式細胞術檢測細胞凋亡率。結果:1.成功培養(yǎng)了人臍靜脈內皮細胞,經免疫熒光法鑒定為內皮細胞。2.
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