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1、非甾體類抗炎藥(NSAIDs)能夠誘導(dǎo)各種腫瘤細(xì)胞的凋亡,從而抑制其生長。有研究證實(shí)作為NSAIDs的一種,NS398除了對(duì)COX-2的選擇性抑制作用外,還可通過其他途徑誘導(dǎo)腫瘤凋亡.本文主要通過在細(xì)胞株A549中加入NS398后,來觀察NS398對(duì)細(xì)胞的凋亡影響并初步探究其可能的凋亡機(jī)制.實(shí)驗(yàn)主要采用MTT法檢測(cè)NS398對(duì)A549細(xì)胞生長的抑制率,并用形態(tài)學(xué)檢查細(xì)胞凋亡情況,同時(shí)用RT-PCR法檢測(cè)survivin、caspase-
2、3 mRNA表達(dá),用Western blot法檢測(cè)survivin、caspase-3和p-AKT蛋白表達(dá)。MTT的結(jié)果顯示NS398能夠抑制A549細(xì)胞生長,其中,NS398(400μmol／L)作用48小時(shí)后,A549細(xì)胞抑制率可高達(dá)66.95％,同時(shí),形態(tài)學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形狀不規(guī)則,核質(zhì)體呈綠色,染色體濃縮,細(xì)胞核大小不一,呈凋亡特征。RT-PCR的結(jié)果顯示,NS398作用48小時(shí)的實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較,survivinmRNA表達(dá)量
3、顯著減少(P<0.05,P<0.01,P<0.001),并且caspase-3 mRNA表達(dá)量顯著增加(P<0.05,P<0.001),均呈劑量依賴性。而作用48小時(shí)后的實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較,survivin和p-AKT蛋白表達(dá)量顯著減少(P<0.01,P<0.001),caspase-3蛋白表達(dá)量顯著增加(P<0.05,P<0.001),均呈劑量依賴性。上述研究結(jié)果表明,NS398能夠誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤生長,其抗腫瘤作用機(jī)制
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