糖尿病合并高度近視豚鼠視網膜組織VEGF,PEDF,F(xiàn)N的表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   探討高度近視對糖尿病視網膜病變(diabeticretinopamy,DR)的阻滯機制,研究高度近視對糖尿病豚鼠視網膜組織中血管內皮細胞生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)、色素上皮衍生因子(pigmentepithelium-derivedfactor,PEDF)、纖維連接蛋白(fibronectin,F(xiàn)N)表達的影響。
   方法:
   分別制作

2、高度近視、糖尿病、糖尿病合并高度近視的三組豚鼠模型。選取出生3天的排除先天性疾病及檢影驗光屈光不正者封閉群健康三色豚鼠60只,標準顆粒飼料飼養(yǎng)。并隨機分為4組:對照組(a組)15只,擬建高度近視動物模型組(b組)15只,擬建糖尿病動物模型(c組)15只,擬建糖尿病合并高度近視動物模型組(d組)15只。b組及d組所有豚鼠建立形覺剝奪性高度近視模型,以半透明塑料眼罩(10ml塑料試管底制成)行右眼遮蓋作為實驗眼。遮蓋6周后將c組及d組的豚鼠

3、按60mg/kg體重給予小劑量多次重復腹腔內注射鏈脲佐菌素(streptozocin,STZ),制作糖尿病豚鼠模型。注射3天后測空腹血糖16.5mmol/L以上,尿量及飲水明顯增多者為糖尿病豚鼠。成模后每周測血糖一次。觀察12周,將中間死亡鼠和血糖恢復鼠棄去,c組剩余的豚鼠中12只作為實驗對象。對d組的已成糖尿病模型的豚鼠去眼罩,右眼結膜囊內滴1%復方托吡咔胺滴眼液3次,間隔10min,帶狀光檢影,屈光度>-6.00D者12只作為實驗對

4、象。b組的豚鼠右眼結膜囊內滴1%復方托吡咔胺滴眼液3次,間隔10min,帶狀光檢影,屈光度>-6.00D者,隨機選取12只作為實驗對象。從對照組里隨機選12只及以上選取的36只,共48只豚鼠的右眼作為采集標本的對象。摘除右眼球后固定于10%的福爾馬林液中,石蠟包埋,制成組織切片,行HE染色和免疫組化染色檢測視網膜的VEGF、PEDF及FN的表達情況。用計算機圖像采集系統(tǒng)采集免疫組化載片圖像。BiosensDigitalImagingAn

5、alysisSystems分析系統(tǒng)對圖像中陽性反應部位進行陽性平均光密度分析。應用SPSS11.0分析軟件進行統(tǒng)計分析,行方差齊性檢驗,再行多組獨立定量資料的方差分析。取α=0.05作為顯著性檢驗水準。
   結果:
   VEGF在各組間的表達水平均有顯著差異。VEGF陽性平均光密度(opticaldensity,OD)在對照組為128.61±5.57,在高度近視組為118.24±2.59,在糖尿病組為155.60±9

6、.70,在糖尿病合并高度近視組為135.15±5.22。糖尿病組VEGF水平明顯高于糖尿病合并高度近視組。PEDF的表達水平除在高度近視組與對照組無差異外,其余各組間均有顯著差異。PEDF陽性平均光密度在對照組為145.57±8.35,在高度近視組為149.54±6.20,在糖尿病組為127.71±2.45,在糖尿病合并高度近視組137.53±7.38。糖尿病組PEDF水平明顯低于糖尿病合并高度近視組。FN的表達水平除在高度近視組與對照

7、組無差異外,其余各組間均有顯著差異。FN陽性平均光密度在對照組114.96±4.98,在高度近視組為113.54±6.84,在糖尿病組為148.06±16.07,在糖尿病合并高度近視組為124.8±3.86。糖尿病組FN水平明顯高于糖尿病合并高度近視組。
   結論:
   1.糖尿病合并高度近視組視網膜組織中的VEGF的表達低于糖尿病組。
   2.糖尿病合并高度近視組視網膜組織中的PEDF的表達高于糖尿病組。

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