1、在肝組織存在纖維化甚至肝硬化的病理改變基礎上，各種致病因子的打擊更容易造成嚴重的肝功能衰竭。終末期肝功能衰竭，臨床治療效果差，給人民健康及醫(yī)療財政帶來了嚴峻的考驗。眾多研究表明肝纖維化形成機制復雜，但具有可逆性。近年來研究發(fā)現(xiàn)MicroRNA在調控肝纖維化形成過程中發(fā)揮著重要的作用，有研究表明促肝纖維化發(fā)展的MicroRNA，其抑制劑能有效的逆轉肝纖維化。因此有關肝纖維化的MicroRNA研究可能為臨床治療肝纖維化帶來新的突破。

2、　　第一部分:構建大鼠免疫性肝纖維化模型
　　目的:明確是否成功構建大鼠免疫性肝纖維化模型。
　　方法:將26只雄性Wistar大鼠隨機分為兩組(A、B)，A組10只，B組16只。A組為正常對照組，生理鹽水腹腔注射（0.5ml/只，2次/周）連續(xù)12周;B組為肝纖維化模型組，其中隨機選取3只為B1組，腹腔注射豬血清0.5ml/只/次，2次/周，共4周;繼續(xù)隨機抽選3只為B2組，腹腔注射豬血清0.5ml/只/次，2次/周，共8

3、周;余下10只為B3組，腹腔注射豬血清0.5ml/只/次，2次/周，共12周。B1、B2組實驗動物分別在第4周末及第8周末處死，留取肝組織進行HE染色、Masson染色，余下全部實驗動物在第12周末次給藥次日處死，留取肝組織進行HE及Masson染色，依據(jù)肝纖維化病理分期方案對大鼠肝纖維化程度進行評分，對膠原纖維面積實行半定量分析。
　　結果:1.HE及Masson染色圖示:肝纖維化模型B1組的肝組織形態(tài)學改變不明顯;B2組肝細胞

4、存在腫脹變性，肝索結構排列較紊亂，結締組織有增生，纖細的纖維間隔形成，但是未見假小葉;B3組肝小葉結構紊亂，肝索排列不規(guī)則，肝竇扭曲，結締組織明顯增生，纖維間隔形成;2.肝纖維化模型B3組肝纖維化程度及膠原纖維面積較正常A組明顯增加，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　結論:通過連續(xù)12周向Wistar大鼠腹腔注射豬血清可成功構建大鼠免疫性肝纖維化模型。
　　第二部分:分析大鼠肝纖維化組織與正常肝組織中MicroRNA

5、的表達差異
　　目的:探索大鼠肝纖維化組織與正常肝組織中MicroRNA的表達差異。
　　方法:在A組與B3組中分別選取3份肝組織標本，用trizol保存送至深圳華大基因進行RNA提取及MicroRNA高通量測序技術檢測，然后分析其表達譜差異，再運用qPCR技術進行結果驗證。
　　結果:與大鼠正常肝組織相比，在豬血清誘導的大鼠免疫性肝纖維化組織中總共有9種MicroRNA發(fā)生了變化，其中MicroRNA-1、Micro

6、RNA-30b-5p、 MicroRNA-144 MicroRNA-451、MicroRNA-674-3p表達下調，而MicroRNA-27a、 MicroRNA-138、MicroRNA-146b、 MicroRNA-342-5p則表達上調。
　　結論:在豬血清誘導的大鼠免疫性肝纖維化組織中MicroRNA的表達譜較正常大鼠肝組織發(fā)生了變化，這些具有顯著差異的MicroRNA可能與肝纖維化的發(fā)生相關。
　　第三部分:研究M

7、icroRNA-138與肝纖維化細胞因子表達的相關性
　　目的:驗證MicroRNA-138與肝纖維化的發(fā)生存在相關。
　　方法:運用qPCR技術檢測A組及B3組（各10只，共20只）全部大鼠肝組織中MicroRNA-138的水平，并同時檢測TGF-β、COL-1、TIMP-1、CTGF的表達。最后運用spss軟件統(tǒng)計分析MicroRNA-138水平與TGF-β、COL-1、TIMP-1、CTGF表達的相關性。
　　結

8、果:1.qPCR技術檢測顯示MicroRNA-138、TGF-β、COL-1、TIMP-1、CTGF在大鼠肝纖維化組織中的表達水平明顯高于正常肝組織，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);2.統(tǒng)計學分析MicroRNA-138與TGF-β、COL-1、TIMP-1及CTGF的相關系數(shù)分別為0.818、0.913、0.87和0.82，顯著性均為p=0.000＜0.01，均有統(tǒng)計學意義。
　　結論:MicroRNA-138與豬血清誘導大