1、目的：對豬囊尾蚴AF239799-1膜聯(lián)蛋白基因進行高效原核表達，對表達產(chǎn)物進行免疫反應性分析。
　　方法:通過DNA自動合成儀，用固相亞磷酸酰胺法合成一段5’端有NdeⅠ內(nèi)切酶位點，3’端有XhoⅠ內(nèi)切酶位點的豬囊尾蚴AF239799-1基因序列，并將其克隆到原核表達載體pET28a(+)中，將其轉(zhuǎn)入到感受態(tài)大腸桿菌 BL21(DE3)中，經(jīng) PCR、雙酶切及基因測序鑒定，確定陽性克隆菌。用1.0mM IPTG對陽性克隆菌進行誘

2、導表達，用SDS-PAGE（十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）對表達產(chǎn)物進行鑒定，并用蛋白質(zhì)印跡法對純化后的重組蛋白進行免疫反應性分析。
　　結(jié)果：合成的基因序列長度為1053 bp，AF239799-1重組蛋白為370個氨基酸，理論分子質(zhì)量、等電點分別為40.39 kDa和6.33； PCR、雙酶切及基因測序鑒定結(jié)果顯示，pET28a(+)-AF239799-1重組質(zhì)粒構建成功，并成功轉(zhuǎn)化到大腸桿菌 BL21(DE3)中；重組