1、目的：通過切除P10幼鼠雙側(cè)腎上腺，來探討雙側(cè)腎上腺切除對N-甲基-D-天冬氨酸誘導的幼鼠的影響。探討高劑量ACTH腹腔注射對N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）誘導的嬰兒痙攣癥的治療效果。探討高劑量ACTH腹腔注射治療嬰兒痙攣癥的作用機理。
　　方法：實驗動物為生后10天Wister幼鼠（P10）。實驗動物隨機分為七組，每組16只，體質(zhì)量相近。①空白組對照組，②腔注射組（ACTH組），③生理鹽水組（NS組），④腎上腺切除組（ADX

2、組），⑤假手術(shù)組(Sham-ADX組)，⑥腎上腺切除+ACTH腹腔注射組(ADX+ACTH組)，⑦假手術(shù)+ACTH腹腔注射組(Sham-ADX+ACTH組)。實驗第一日，將32只P10幼鼠雙側(cè)腎上腺切除，32只生后P10幼鼠行雙側(cè)腎上腺切除假手術(shù)，實驗次日，在16只未處理的P11鼠、16只腎上腺切除鼠、16只假手術(shù)幼鼠分別進行腹腔注射ACTH(100U/Kg），其對照組幼鼠給予同劑量生理鹽水腹腔注射。在ACTH腹腔注射后30分鐘后，給予

3、各組P11仔鼠腹腔注射NMDA溶液（7mg/Kg），誘發(fā)幼鼠抽搐發(fā)作，建立嬰兒痙攣癥模型。NMDA給藥之后觀察3小時，比較各實驗組幼鼠的行為活動、抽搐狀況，記錄癲癇潛伏期，并根據(jù)癲癇模型評分表進行癲癇評分。觀察并記錄抽搐發(fā)作3小時后，迅速斷頭取血、分離腦組織。應用放射免疫分析法檢測血中ACTH及皮質(zhì)酮水平，原位雜交方法檢測腦組織中CRHmRNA表達水平。使用SPSS10.0統(tǒng)計軟件包完成統(tǒng)計，采用獨立樣本t檢驗及單因素方差分析。

4、　　結(jié)果：與生理鹽水組對比，ACTH組幼鼠潛伏期增加55％(F=41.75,p<0.05)。與對照組相比ADX組潛伏期降低13%(F=6.269,p<0.05),但是對照組與Sham-ADX組間的癲癇潛伏期對比無顯著性差異（p>0.05)。腹腔注射ACTH后，ADX組的潛伏期延長28%(t=4.199,p<0.05)。腹腔注射ACTH后，Sham-ADX組潛伏期與未用藥前相比具有顯著性差異較(t=2.420,p<0.05)。在ADX+A

5、CTH組與Sham-ADX+ACTH組之間潛伏期無顯著意義(t=1.216,p>0.05)。ACTH組的癲癇評分明顯低于生理鹽水組及空白組(F=19.578,p<0.05)。與空白組及假手術(shù)組進行統(tǒng)計學分析顯示，切除雙側(cè)腎上腺后，ADX組幼鼠癲癇評分增加18%(F=10.080,p<0.05)。與ADX組相比，ADX+ACTH組癲癇評分降低34%(t=9.244,p<0.05)。與Sham-ADX組相比，Sham-ADX+ACTH組癲癇

6、評分也明顯降低(t=4.884,p<0.05)。ADX+ACTH組與Sham-ADX+ACTH癲癇評分無顯著性差異(t=0.988,p>0.05)。ACTH明顯降低了NMDA誘導的幼鼠癲癇評分，并不依賴于腎上腺分泌的糖皮質(zhì)激素。在ACTH組，血漿皮質(zhì)醇濃度是對照組的8.7倍，ACTH濃度是對照組的11倍。腎上腺切除組幼鼠及ADX+ACTH組幼鼠血漿皮質(zhì)醇均低于檢測下限。ADX組血漿ACTH濃度較對照組明顯增加42%。ADX+ACTH組血

7、漿ACTH濃度與Sham-ADX+ACTH組有明顯差異。ACTH組CRHmRNA表達明顯不同于控制組。ACTH腹腔注射3小時后，CRHmRNA表達較空白對照組下降62%(F=384.643,p<0.05)。腎上腺切除鼠CRHmRNA表達明顯高于對照組。ADX組幼鼠CRHmRNA較假手術(shù)組幼鼠高10%(F=30.259,p<0.05)。腎上腺切除組鼠CRHmRNA的過渡表達可被腹腔注射ACTH逆轉(zhuǎn)(t=18.467,p<0.05)。假手術(shù)

8、組CRHmRNA表達也被腹腔注射ACTH所明顯降低(t=14.635,p<0.05)。CRHmRNA表達在ADX+ACTH組與Sham-ADX+ACTH組之間無顯著性差異(t=1.229,p＞0.05)。
　　結(jié)論：P11幼鼠腹腔注射單一高劑量ACTH（100U/Kg）后，對致癇劑NMDA的敏感性明顯降低。切除雙側(cè)腎上腺后，幼鼠對致癇劑NMDA的敏感性明顯增高。通過該試驗可初步認為：腎上腺皮質(zhì)功能不良的嬰兒可能更易罹患嬰兒痙攣癥，

9、這對進一步臨床研究嬰兒痙攣癥病因及發(fā)病機制有重要意義。切除雙側(cè)腎上腺后給予大劑量ACTH，NMDA誘導的痙攣潛伏期延長，癲癇評分提高，提示ACTH具有不依賴外周腎上腺糖皮質(zhì)激素的抗癲癇特性，其具有非激素依賴的中樞性抗癲癇作用。ACTH治療組海馬CRHmRNA表達明顯降低，在腎上腺切除組，ACTH治療同樣降低了海馬CRHmRNA的表達水平。提示高劑量ACTH治療可以通過降低海馬CRHmRNA表達來發(fā)揮抗癲癇作用，ACTH下調(diào)海馬CRFmR