1、目的:
　　 觀察給予不同濃度的瑞舒伐他汀作用24小時后，對體外培養(yǎng)的人成骨細胞增殖及低密度脂蛋白受體相關蛋白5(LRP5)、Runx2基因表達的影響，初步探討瑞舒伐他汀影響骨代謝可能的分子機制。
　　 方法:
　　 1.收集成年男性髂骨松質骨（由山西醫(yī)科大學第二臨床醫(yī)學院骨科手術室在正常手術過程中提供）。采用酶消化法分離并純化成骨細胞，體外培養(yǎng)人成骨細胞，觀察其形態(tài)和功能。
　　 2.以體外培養(yǎng)的人成骨

2、細胞為實驗模型，取對數期生長良好的成骨細胞，給予不同劑量的瑞舒伐他?。?10-910-810-710-6 mol/l）作用24小時后，應用CCK-8比色法觀察細胞的增殖能力、測定OD值。
　　 3.在成骨細胞傳代過程中，取5瓶生長良好、生長率達70-80％的成骨細胞，不同劑量（010-910-810-710-6 mol/l）的瑞舒伐他汀干預24小時后，棄去培養(yǎng)液，運用Trizo(l)法分別提取總RNA，用熒光定量PCR法檢測成骨

3、細胞LRP5、Runx2基因的相對表達水平。
　　 4.統計學處理:實驗所得數據用均數±標準差表示，應用SPSS17.0軟件進行分析。各組總體上有無差別采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD法分析，P＜0.05為差異有統計學意義。
　　 結果:
　　 1.體外培養(yǎng)的人成骨細胞倒置顯微鏡觀察:原代細胞培養(yǎng)3天后貼壁，梭形、多角形多見，12-15天左右單層鋪滿瓶壁。傳代細胞多為梭形或三角形，細胞核大，有多種突起，

4、胞漿內可見黑色顆粒。骨鈣素免疫組化染色細胞呈陽性反應，胞漿可見棕黃色顆粒狀物質。茜素紅染色呈紅色陽性鈣化結節(jié)2.不同劑量的瑞舒伐他?。?10-910-810-710-6 mol/l）作用成骨細胞24小時后，采用CCK-8比色法顯微鏡下觀察，成骨細胞數量明顯增加、各組OD值均增加，濃度在10-7 mol/l增殖最明顯。對照組與實驗組，實驗各組間比較差異均有統計學意義(P＜0.05)。
　　 3.不同劑量的瑞舒伐他?。?10-910

5、-810-710-6 mol/l）干預成骨細胞24小時，采用熒光半定量PCR法檢測，結果顯示:成骨細胞LRP5、Runx2基因表達相對增加，濃度在10-7mol/l基因表達增加最明顯。對照組與實驗組，實驗組各組間比較均有統計學意義(P＜0.05)。
　　 結論:
　　 1.瑞舒伐他汀可促進成骨細胞的增殖。
　　 2.瑞舒伐他汀可能通過增加成骨細胞LRP5、Runx2基因的相對表達水平，促進細胞增殖，影響骨代謝。<