1、原發(fā)性高血壓（Essential Hypertension，EH）占高血壓患病率的95％以上，作為心血管疾病最主要的危險(xiǎn)因素之一，越來(lái)越受到人們的重視。近年來(lái)，我國(guó)EH患病率有逐年增加的趨勢(shì)，已經(jīng)成為影響人群健康的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題。EH是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的多基因病，由于遺傳因素在EH的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，目前尋找其相關(guān)基因的單核苷酸多態(tài)（single-nucleotide polymorphisms，SNPs）進(jìn)而闡明

2、它們發(fā)病的遺傳機(jī)制己經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。
　　 膽固醇7α-羥化酶基因（CYP7A1基因）是脂類代謝的重要基因。本研究通過(guò)NCBI的SNP數(shù)據(jù)庫(kù)找到CYP7A1基因的上游調(diào)控區(qū)有個(gè)單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)rs1125226，該位點(diǎn)多態(tài)性與膽固醇7α-羥化酶的功能，及EH的發(fā)生是否有關(guān)，尚無(wú)報(bào)道。因此，本研究擬以該人群為基礎(chǔ)，通過(guò)病例對(duì)照研究，探討CYP7A1基因rs1125226多態(tài)位點(diǎn)與EH的發(fā)生是否相關(guān)及其關(guān)聯(lián)程度。
　　 對(duì)象

3、與方法：
　　 一、研究對(duì)象的選擇
　　 本研究利用前期已在遼寧西部彰武地區(qū)用整群抽樣的方法調(diào)查的6000例樣本人群。在年齡為25歲至65歲范圍內(nèi)的漢族人群中，隨機(jī)抽取300名EH患者作為病例組；并在同樣年齡范圍的正常人群中隨機(jī)抽取300人作為對(duì)照組，收集其資料和血樣。
　　 二、高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)及測(cè)量方法
　　 EH的診斷及分級(jí)依據(jù)1999年WHO-ISH（世界衛(wèi)生組織/國(guó)際高血壓協(xié)會(huì)）高血壓治療指南公布

4、的標(biāo)準(zhǔn)：收縮壓（systolic blood pressure，SBP）≥140mmHg和（或）舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）≥90mmHg。高血壓的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：一級(jí)高血壓：140mmHg≤SBP<160mmHg和（或）90mmHg≤DBP<100mmHg；二級(jí)高血壓：160mmHg≤SBP<180mmHg和（或）100mmHg≤DBP<110mmHg；三級(jí)高血壓：SBP≥180mmHg和（或）DBP≥

5、110mmHg。血壓的測(cè)量由醫(yī)護(hù)人員在標(biāo)準(zhǔn)條件下按照統(tǒng)一的規(guī)范進(jìn)行操作。
　　 三、人群流行病學(xué)調(diào)查內(nèi)容
　　 以現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量和詢問(wèn)的方式調(diào)查并填寫(xiě)調(diào)查表。內(nèi)容包括：①一般狀況：包括年齡、性別、民族、家庭住址、家庭人口數(shù)等。②可能與EH發(fā)病有關(guān)的危險(xiǎn)因素：包括食鹽量、飲食習(xí)慣、吸煙情況、飲酒情況、家族史、既往史等。⑨體格檢查：測(cè)量身高、體重、收縮壓、舒張壓等，并計(jì)算體重指數(shù)（Body Mass Index.BMI）。④血樣采

6、集：現(xiàn)場(chǎng)抽取早晨空腹非抗凝靜脈全血5ml，經(jīng)離心后分離血清；抽取EDTA抗凝靜脈全血6ml，混勻不離心。血樣凍存在-20℃的冰箱中備用。
　　 四、檢測(cè)指標(biāo)及測(cè)定方法
　　 采用日本全自動(dòng)生化分析儀（7150型）檢測(cè)血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（serum triglyceride，TG）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein cholesterol，HDL

7、）、低密度脂蛋白（low-density lipoprotein cholesterol，LDL）、血清鈉、血清鉀、血清鐵、血清鈣等指標(biāo)。采用美國(guó)強(qiáng)生公司生產(chǎn)的穩(wěn)捷基礎(chǔ)型血糖分析儀檢測(cè)血糖水平。基因型的檢測(cè)應(yīng)用Real-time PCR（ABI 7500）方法，Taqman-MGB探針和引物（c_8893122_10）由ABI公司（Applied Biosystems，美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）設(shè)計(jì)。
　　 五、資料統(tǒng)計(jì)分析方法

8、r>　　 采用SPSS13.0建立數(shù)據(jù)庫(kù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X-±SD）表示，組間差異應(yīng)用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以人數(shù)和率表示，其關(guān)聯(lián)分析和Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)應(yīng)用χ2檢驗(yàn)。多因素分析采用多元Logistic逐步回歸的方法。統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性水平規(guī)定為α=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 一、EH組與對(duì)照組的均衡性分析
　　 EH組和對(duì)照組間，性別年齡分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。EH組中除了收縮壓和舒張壓明顯

9、高于對(duì)照組外，飲酒比例，BMI，血清膽固醇，甘油三酯，LDL，血鐵，血鈣和血鈉指標(biāo)也分別高于對(duì)照組；而HDL和血鉀水平則低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 二、CYP7A1基因，基因rs1125226多態(tài)位點(diǎn)在EH與對(duì)照間的分布情況
　　 1、本研究人群的Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)和等位基因頻率
　　 該多態(tài)位點(diǎn)在本研究的病例-對(duì)照人群中，基因型頻率和等位基因頻率分布符合Haydy-W

10、eingerg）平衡（χ2=3.752，P=0.053）。本文596名病例對(duì)照人群等位基因A頻率為0.3817，與HapMap報(bào)道的中國(guó)漢族人群該位點(diǎn)的等位基因A頻率（0.38）一致。
　　 2、高血壓組與對(duì)照組間的基因型和等位基因的分布
　　 經(jīng)過(guò)關(guān)聯(lián)分析后，并未發(fā)現(xiàn)CYP7A1基因rs1125226多態(tài)位點(diǎn)的基因型頻率或等位基因頻率與EH的發(fā)生有統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)。
　　 3、高血壓患者分組后的基因型和等位基因的分布

11、
　　 為了進(jìn)一步探究EH患者間該多態(tài)位點(diǎn)的基因型和等位基因的分布情況，本研究將EH患者按照高血壓分級(jí)，收縮壓級(jí)別和舒張壓級(jí)別分別劃分成三個(gè)組。結(jié)果顯示，在不同程度的EH患者間，基因型和等位基因分布也均未見(jiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 4、性別分層后高血壓組與對(duì)照組問(wèn)的基因型和等位基因的分布
　　 將病例對(duì)照人群以性別因素分層后，再次進(jìn)行基因型和等位基因分布與EH的關(guān)聯(lián)分析，不同性別間仍未發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)基因型頻率或等位基因頻

12、率與EH的發(fā)生相關(guān)。
　　 5、年齡分層后高血壓組與對(duì)照組間的基因型和等位基因的分布
　　 將病例對(duì)照人群以年齡因素分層后進(jìn)行基因型和等位基因分布與EH的關(guān)聯(lián)分析。在25-35歲和35-45歲年齡段人群中，基因型頻率在EH組與對(duì)照組間的分布分別出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=7.31，P=0.026和χ2=6.66，P=0.036）。其中25-35歲的EH組中AA基因型頻率（25％）略高于對(duì)照組（20％）；35-45歲的EH組中A

13、A基因型頻率（26.6％）明顯高于對(duì)照組（10.8％）。
　　 三、研究人群高血壓發(fā)生的多因素分析
　　 Logistic回歸分析結(jié)果顯示：經(jīng)其他因素調(diào)整后，rs1125226位點(diǎn)基因型未能進(jìn)入高血壓模型。飲酒情況，BMI，TG，LDL，血清Na和血清K指標(biāo)進(jìn)入了回歸方程。其中除血清K是高血壓發(fā)生的保護(hù)因素外（OR=0.514，95％CI：0.319～0.827），其余各指標(biāo)均是高血壓發(fā)生的危險(xiǎn)因素。
　　 討論

14、：
　　 在本研究納入的298名彰武地區(qū)的EH人群中，合并TC異常的有146名（49.2％），合并GTG異常的有96名（32.3％），合并LDL-C異常的有109名（36.7％），合并：HDL-C降低的有21名（7.1％）。其中Tc、TG、LDL-C，和HDL-C四個(gè)指標(biāo)中至少有一種指標(biāo)超出正常范圍的有193人（64.98％）?？梢?jiàn)，本研究人群EH合并血脂異常的情況非常普遍，這與其他研究結(jié)論相似，說(shuō)明本地區(qū)人群EH的發(fā)生與血脂異

15、常可能有著密切的關(guān)聯(lián)，即血壓調(diào)節(jié)和血脂代謝可能存在共同的遺傳基礎(chǔ)。
　　 迄今為止，通過(guò)連鎖分析和候選基因的關(guān)聯(lián)分析，己經(jīng)確定了150多種EH候選基因及其相應(yīng)的多態(tài)性位點(diǎn)。實(shí)際上，某些基因多態(tài)性只與一定的中間表型或一定的種族或人群相關(guān)，而不同人群中必定有不同的基因與EH相關(guān)。這些事實(shí)闡明了EH的復(fù)雜性和多效性，即EH具有明顯的種族差異，不同人群中無(wú)主效基因，可能存在多個(gè)“微效基因”的聯(lián)合作用。有時(shí)單一基因?qū)ρ獕旱挠绊懯怯邢薜?，?/p>

16、多個(gè)微效基因的聯(lián)合作用可能對(duì)血壓的影響達(dá)到一個(gè)閉值而促使EH的發(fā)病。這可能也是本研究未發(fā)現(xiàn)CYP7A1基因rs1125226多態(tài)位點(diǎn)上的基因型或等位基因頻率與遼寧西部地區(qū)人群EH的發(fā)生有關(guān)聯(lián)的原因。然而，該多態(tài)位點(diǎn)的基因型分布頻率在該地區(qū)中青年人群（25-45歲）中卻可能與EH的發(fā)生有關(guān)，其中AA基因型可能是該地區(qū)中青年人群EH發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（調(diào)整后OR=3.399，95％CI：1.299～8.893，P=0.013）。
　　

17、 另外，本研究采用了目前公認(rèn)的多元Logistic逐步回歸模型，分析了遺傳與環(huán)境因素在EH的發(fā)生中所起的作用。分析結(jié)果顯示，CYP7A1基因rs1125226多態(tài)位點(diǎn)基因型，作為自變量未能進(jìn)入EH的病因模型。我們還發(fā)現(xiàn)，在本地區(qū)居民EH的發(fā)病危險(xiǎn)因素中，優(yōu)勢(shì)比值OR>1.5的因素有高水平LDL和飲酒。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查我們知道，本地人群確實(shí)有高脂飲食，酗酒等不良生活習(xí)慣。因此，如果該地區(qū)居民能改善這兩方面的生活習(xí)慣，相信該地區(qū)EH高發(fā)的情

18、況很可能會(huì)得到有效的控制和預(yù)防。
　　 結(jié)論：
　　 在遼寧彰武地區(qū)人群中，CYP7A1基因rs1125226多態(tài)位點(diǎn)與EH的發(fā)生可能無(wú)關(guān)。然而，該多態(tài)位點(diǎn)的基因型分布在該地區(qū)中青年人群（25-45歲）中可能與EH的發(fā)生有關(guān)，其中AA基因型可能是中青年人群EH發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。另外，EH病因的多因素分析顯示：飲酒，高水平BMI，高水平TG，高水平LDL，高水平的血清Na及低水平的血清K是該地區(qū)人群EH發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素