1、目的:Neuroserpin作為一種功能性的絲氨酸蛋白酶抑制劑，在中樞發(fā)揮重要的神經(jīng)保護(hù)功能，并且其神經(jīng)保護(hù)功能是否跟其組織型纖溶酶原激活劑的抑制活性相關(guān)頗受爭議。本課題旨在探討NSP對視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護(hù)功能及其保護(hù)功能是否依賴于對組織型纖溶酶原激活劑的抑制。
　　方法:本課題主要使用了野生鼠(WT)和tPA基因敲除鼠（tPA-/-）。先采用微量注射器對成年鼠玻璃體腔注射1ul的NSP或者時等體積胎牛血清(BSA)對照液，

2、然后采用前房灌注系統(tǒng)急性升高眼內(nèi)壓至120mmhg并持續(xù)60mins，建立視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷模型。在建模之后1天、7天采用ERG技術(shù)對缺血再灌注損傷后視網(wǎng)膜功能進(jìn)行評估，采用TUNEL染色對視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)進(jìn)行評估，同時采用蛋白印記(western blot)技術(shù)對視網(wǎng)膜caspase-3、cleaved caspase-3、caspase-9、cleaved caspase-9、caspase-8、cleaved caspase-8、PA

3、RP及cleaved PARP進(jìn)行測量。最后，采用免疫熒光技術(shù)和western blot技術(shù)探究NSP在視網(wǎng)膜缺血灌注注損傷中的表達(dá)及其表達(dá)的分布。
　　結(jié)果:通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷導(dǎo)致嚴(yán)重的視網(wǎng)膜功能損害和視網(wǎng)膜神經(jīng)元凋亡，而預(yù)先玻璃體腔預(yù)注射NSP顯著保護(hù)視網(wǎng)膜損傷，而且NSP的視網(wǎng)膜保護(hù)功能在WT和tPA-/-鼠中相似。同時實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在缺血損傷的視網(wǎng)膜中，caspase-3， caspase-9、PARP顯著激活，