1、在組織損傷或炎癥狀態(tài)下，去甲腎上腺素能神經(jīng)的可塑性變化會影響其對抗傷害性刺激的效能。在生理和病理?xiàng)l件下，去甲腎上腺素(noradrenaline，NA)是激活腎上腺素能受體的關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì)。有趣的是，α1-腎上腺素能受體和α2-腎上腺素能受體在背根神經(jīng)節(jié)（dorsalrootganglion,DRG）初級傳入神經(jīng)元都有表達(dá)并且調(diào)節(jié)神經(jīng)源性炎癥和傷害性刺激反應(yīng)。在體外培養(yǎng)的大鼠DRG神經(jīng)元中，NA可以通過激活α1-腎上腺素能受體而非α2-腎

2、上腺素能受體來抑制熱激活的K+通道電流。NA的釋放可參與調(diào)節(jié)傷害感受性刺激。P物質(zhì)(substanceP，SP)是一個含11個氨基酸的神經(jīng)肽，存在于支配周圍組織的感覺神經(jīng)內(nèi)，可參與炎癥反應(yīng)和傷害感受性刺激的調(diào)節(jié)。對傷害感受性刺激作出反應(yīng)的DRG初級傳入神經(jīng)元具有表達(dá)SP的特征。SP的釋放可激活上行感覺神經(jīng)元將痛覺信號從周圍神經(jīng)系統(tǒng)(peripheralnervoussystem，PNS)傳遞到中樞神經(jīng)系統(tǒng)（centralnervouss

3、ystem，CNS）。SP從周圍神經(jīng)末梢的釋放會引起神經(jīng)源性炎癥。很多因素或物質(zhì)會引起SP釋放而導(dǎo)致神經(jīng)源性炎癥。有實(shí)驗(yàn)證實(shí)α1-腎上腺素能受體激動劑苯腎上腺素會引起辣椒素(capsaicin，CAP)敏感感覺神經(jīng)末梢釋放P物質(zhì)。由注射CAP引起的神經(jīng)源性炎癥和疼痛取決于對交感傳出神經(jīng)釋放NA的反應(yīng)。激活或抑制α-腎上腺素能受體是否會影響DRG神經(jīng)元SP的表達(dá)和釋放目前仍不清楚。本研究建立胎鼠DRG神經(jīng)元分散培養(yǎng)的模型，用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶

4、鏈反應(yīng)(reversetranscription-polymerasechainreaction，RT-PCR)分析技術(shù)、蛋白質(zhì)印跡法(Westernblotassay)、免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)，研究α-腎上腺素能受體激動劑NA和α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嗪和α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對體外培養(yǎng)的DRG神經(jīng)元SP的表達(dá)和釋放的影響作用。本課

5、題的研究結(jié)果如下:(1)RT-PCR分析結(jié)果顯示，培養(yǎng)液中加入α-腎上腺素能受體激動劑NA、α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嗪和α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對DRG神經(jīng)元編碼SP的前速激肽原(preprotachykinin，PPT)mRNA的表達(dá)水平?jīng)]有顯著影響。(2)蛋白質(zhì)印跡法分析結(jié)果顯示，α-腎上腺素能受體激動劑NA、α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嗪和α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對DRG神經(jīng)元SP的表達(dá)水平?jīng)]有顯著影響。(

6、3)免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)研究結(jié)果顯示，α-腎上腺素能受體激動劑NA、α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嗪和(α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對表達(dá)SP的神經(jīng)元比率沒有顯著影響。(4)ELISA分析結(jié)果顯示，α-腎上腺素能受體激動劑NA、α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嚷和α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對SP的基礎(chǔ)釋放量沒有顯著影響;而NA可增加CAP誘發(fā)的SP釋放量，哌唑嗪預(yù)處理能夠減少由NA導(dǎo)致的CAP誘發(fā)的SP釋放量的增加，育亨賓對NA誘導(dǎo)