1、目的:觀察金釵石斛總堿對高糖誘導(dǎo)的大鼠腎小球系膜細胞增殖及基質(zhì)積聚和過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPAR-γ)的表達影響影響及其機制。
　　 方法:1、金釵石斛干品經(jīng)酸性乙醇提取后通過強酸性陽離子交換樹脂富集，鑒定方法選用氣質(zhì)聯(lián)用分析，總堿含量采用酸性染料比色法測定。2、將大鼠腎系膜細胞分為正常對照組(NC)、高糖對照組(HG)、溶媒對照組(MC)、羅格列酮對照組(ROZ)、金釵石斛總堿低(LD)、中(MD)、高(HD)劑量組

2、，各組細胞3份重復(fù)，分別藥物作用24h后通過CCK-8法檢測細胞增殖情況。3、qPCR法檢測TGF-β1、FN及PPAR-γ mRNA的表達情況。4、免疫熒光細胞化學(xué)法、酶聯(lián)免疫法、免疫印跡法分別檢測FN、TGF-β1、PPAR-γ的蛋白表達情況。
　　 結(jié)果:①金釵石斛提取物總堿為黃褐色晶體顆粒，不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿等有機溶劑，經(jīng)氣質(zhì)聯(lián)用檢測分析，確定為金釵石斛堿成分，酸性染料比色法測定總堿含量約為69％;②CCK

3、-8法檢測發(fā)現(xiàn)，金釵石斛總堿各組細胞增殖率均低于高糖模型組(P＜0.05);③相較于高糖模型組，金釵石斛總堿各劑量組TGF-β1、FN mRNA表達量降低(P＜0.05);④相較于高糖模型組，金釵石斛總堿各劑量PPAR-γ mRNA表達無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);⑤Western blot檢測PPAR-γ蛋白表達，金釵石斛總堿中、低劑量組表達量相較于高糖模型組無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，金釵石斛總堿高劑量組降低(P＜0.05)。