1、篁1108813分類號：7811學校代碼：10392福建醫(yī)科大學碩士學位論文凍存骨髓基質(zhì)細胞在誘導條件下成骨潛能的實驗研究StudyOnosteogenicpotentialofcryopreservedbonemalTOWstromalcellsinvitroandinvivo接收院(系)：福建醫(yī)科大學口腔醫(yī)學院申請人：袁芳學科(專業(yè))：口腔臨床醫(yī)學導師：閏福華教授研究起止日期：2004年10月至2007年5月：oo七年五月凍存骨髓基

2、質(zhì)細胞在誘導條件下成骨潛能的實驗研究中文摘要目的：骨髓基質(zhì)細胞(bonemarrowstromalcells，BMSCs)作為間充質(zhì)細胞，具有多向分化潛能，是一種理想的骨組織工程的種子細胞，有著廣泛的應用前景隨著細胞生物學及組織工程學研究的深入和發(fā)展，對BMSCs的需求量越來越大，故對其進行長期、大量的保存十分必要。本實驗通過對凍存一年后Beagle犬BMSCs進行復蘇，傳代擴增與誘導分化，探討凍存后BMSCs在體外的成骨潛能，同時，建

3、立實驗動物模型，探討凍存BMSCs與膠原膜構(gòu)建細胞和支架材料復合體在裸鼠體內(nèi)的成骨能力，為進一步研究BMSCs修復頜骨缺損、牙周組織缺損的臨床應用提供科學依據(jù)。方法：本研究分為體外細胞實驗和動物體內(nèi)實驗兩個部分：第一部分凍存骨髓基質(zhì)細胞體外成骨潛能的實驗研究：選取于液氮中凍存11個月后的成年Beagle犬陰sCs復蘇后進行體外擴增培養(yǎng)，并在實驗組傳代培養(yǎng)中加入101∞l／L地塞米松、50mg／L維生素C和lOmlol／LB一甘油磷酸鈉進

4、行誘導分化，對照組未加礦化誘導液，對比觀察細胞生長形態(tài)、細胞誘導前后增殖情況、細胞堿性磷酸酶(alkalinephosphatase，ALP)含量以及形成礦化結(jié)節(jié)能力的改變。第二部分凍存骨髓基質(zhì)細胞和膠原膜復合材料在裸鼠體內(nèi)的成骨潛能研究：體外分離培養(yǎng)Beagle犬蹦sCs，凍存二代生長狀況良好的BMSCs。12個月后，復蘇凍存的酬scs，并在體外構(gòu)建BMSCs和0505cm2大小的BME—IOX復合體將膠原膜BMSCs礦化誘導培養(yǎng)液、