1、目的： 為了解雷帕霉素、PLA以及兩者結合后對實驗動物體內血小板在支架部位沉積的影響并為其臨床應用及產品開發(fā)提供試驗數據支持，本研究探索：可降解PLA涂層雷帕霉素L605鈷鉻合金支架(實驗組)、苯乙烯丁烯嵌段共聚物涂層雷帕霉素洗脫鈷基合金支架(商品名火鳥2支架)、PLA涂層L605鈷鉻合金支架、L605鈷鉻合金裸支架置入3天后血小板在支架表面的沉積情況以及之間的差異。方法本研究采用<'99m>TC體外標記血小板并回輸體內進行γ計

2、數、放射活性測定的方法，以未置入支架的髂動脈的血小板沉積情況為基本參照，定量研究不同支架置入髂動脈3天以后體內血小板在支架部位的沉積及其之間的差異。同時采用核素顯像及掃描電鏡觀察的方法定性研究血小板沉積情況。 定量研究：按表1在每只兔子的左右髂動脈處分別置入一個支架，共置入5個可降解PLA涂層雷帕霉素支架、5個火鳥2支架、5個裸金屬支架、5個PLA涂層支架。3天后從耳緣靜脈抽取靜脈血并分離血小板，用<'99m>Tc標記血小板后回

3、輸體內，2小時后麻醉動物進行核素顯像，以確定核素全身分布及在支架部位有無核素顯影，處死動物取材后再重復核素顯像，并和之前的核素顯像比較，以證明核素聚集部位是否是支架安放部位。同時將支架置入的髂動脈段、未安放支架的髂動脈段放入γ井中計數，并抽取全血標本以測定游離和細胞結合<'99m>Tc的活性及血小板計數，并計算出血小板沉積數，最后將取材的標本(支架置入的髂動脈段、未置入支架的髂動脈段)制備成掃描電鏡標本進行觀察，比較不同支架置入的血管段

4、血小板沉積的差異。 本研究所用支架均由微創(chuàng)醫(yī)療器械(上海)有限公司提供，攜帶雷帕霉素的劑量為9微克/毫米支架，PLA的劑量為400微克。 一、<'99m>Tc標記血小板的方法學評價。 結合國內外文獻及反復實驗，改進了目前國內現有條件下<'99m>Tc標記血小板的方法。結果表明：當還原劑酒石酸亞錫溶液PH值為3、亞錫離子濃度為4.5mmol/L、水浴時間為30分鐘時，血小板標記率最高且較為穩(wěn)定，為(29.7±3.6

5、)％，并且能使血小板保持一定的活性。 二、放射性核素體外顯像結果： 本研究在<'99m>Tc標記的血小板回輸體內后引入核素顯像的方法，動態(tài)觀察核素在全身的分布情況，同時著重了解安放支架部位是否有核素聚集。首先發(fā)現：在回輸標記血小板2小時后全身核素分布達到較為穩(wěn)定的狀態(tài)。此時，用雙探頭SPECT(Siemens，E.CAM)進行全身平面顯像，共采集300K計數，結果顯示：核素主要濃聚于肝、脾、雙腎、膀胱及安放支架處，其中可

6、降解PLA涂層雷帕霉素支架顯像最為明顯，裸金屬支架部位不顯像，其余2個支架組部分顯像并且不明顯。然后，對支架置入部位進行局部顯像，共采集100K計數，結果顯示：核素在部分安放支架部位有核素聚集并顯像。最后，處死動物將安放支架血管取走后，再次進行核素顯像，發(fā)現原支架安放部位幾乎沒有核素的濃聚。 三、不同支架對血小板沉積影響的定量研究： 本研究以可降解PLA涂層雷帕霉素支架為實驗組，以PLA涂層支架、火鳥2支架、裸金屬支架為

7、對照組，以未安放支架的髂動脈組為空白對照組，以血小板沉積數為指標，比較各組對血小板沉積的影響差異，結果如表2、表3。在血小板標記率及全血血小板計數兩項指標上，各組沒有統(tǒng)計學差異(P>0.05)。備注：A：可降解PLA涂層Rap鋤ycin L605鈷鉻合金支架組 B：可降解PLA涂層支架組 C：火鳥2支架組D：L605鈷鉻合金裸支架組 E：未安放支架的髂動脈組結果表明，可降解PLA涂層Rapamycin L605鈷鉻合金支架較對照組火鳥2

8、支架明顯增加血小板沉積，PLA涂層支架本身也顯著增加血小板沉積。 四、掃描電鏡結果： 本研究對實驗組、對照組支架置入的髂動脈段以及未置入支架的髂動脈段進行掃描電鏡的觀察，結合血小板人工計數半定量分析，結果表明：與定量分析結果一致，PLA涂層攜載雷帕霉素支架組在支架部位的血小板沉積在所有組中最多，其次血小板沉積較多的是火鳥2支架組和PLA涂層支架組，BMS支架組在支架部位的血小板沉積較少，未置入支架髂動脈組局部血小板沉積最

9、少。 1、經過本研究改進的、在國內現有實驗條件下利用<'99m>Tc標記血小板的方法，具有標記率較高、穩(wěn)定、血小板活性受影響小、簡便廉價等優(yōu)點，是目前國內標記血小板方法的理想選擇。 2、支架所攜帶的雷帕霉素及可降解PLA涂層在體內分別能增加支架部位血小板的沉積(P<0.05)；可降解PLA涂層雷帕霉素支架較苯乙烯丁烯嵌段共聚物涂層雷帕霉素支架能更進一步的顯著增加支架部位的血小板沉積CP<0.05)，此點在支架的設計上必須