1、20世紀五十年代,人們發(fā)現(xiàn)粘細菌(myxobacteria)能夠產(chǎn)生抗生素,此后具有生物學活性的粘細菌的分離篩選就成為人們的研究熱點之一,尤其是從粘細菌中發(fā)現(xiàn)、分離及鑒定新的抑菌、抗腫瘤化合物。
　　本論文首先對實驗室保藏的16株粘細菌進行搖瓶發(fā)酵,提取其粗產(chǎn)物,采用濾紙片法、生長速率抑制法進行抑菌活性篩選,采用MTT法進行抗腫瘤活性篩選。結果顯示,菌株m03粗產(chǎn)物的抑真菌效果最好,抑菌譜較寬,對白色念珠菌、釀酒酵母、煙曲霉、根霉

2、、黑曲霉、青霉、毛霉的抑菌直徑分別為14.5mm、12.3mm、8.8mm、14.0mm、10.2mm、13.3mm、11.3mm,對紋枯病原菌和稻瘟霉的抑制率為72.4％和69.3％;菌株m01粗產(chǎn)物的抑細菌活性最好,能夠較好的抑制腸炎桿菌、大腸桿菌、巨大芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌的生長,抑菌圈直徑分別為9.6mm、9.8mm、10.2mm、10.2mm、21.4mm,菌株m11、m01和m16對白血病癌細胞K562抑制活性較強,其IC

3、50值分別為11μg/mL、21μg/mL和21μg/mL。
　　隨后對抑真菌活性最高的菌株m03和抗腫瘤活性最高的菌株m11進行固體平板和液體搖瓶培養(yǎng),通過液體培養(yǎng)形態(tài)、固體菌落形態(tài)、細胞形態(tài)等形態(tài)學特征及生理生化實驗,并結合16SrDNA分子生物學序列分析,最終確定菌株m03為橙色粘球菌(Myxococcus fulvus),菌株m11為粘球菌屬(Myxococcus.sp)。分析了兩菌株的生長特性,考察了兩菌株的生長曲線,確

4、定兩菌株的最佳培養(yǎng)條件為:玉米淀粉、酵母浸粉、添加生長因子維生素B12,無機鹽選擇硫酸鎂,最適pH值8.0,最適培養(yǎng)溫度為30℃,轉(zhuǎn)速140r/min,接種量10％,種齡56h,裝液量60mL(300mL三角瓶)。
　　進一步對菌株m03進行大規(guī)模發(fā)酵,提取粗產(chǎn)物,通過硅膠柱、凝膠柱、反相柱等多種層析分離手段,對粗產(chǎn)物進行分離純化,最終得到5個化合物M1-M5,并通過核磁共振、質(zhì)譜等波譜手段進行結構鑒定,發(fā)現(xiàn)它們均為已知化合物:M