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![益腎湯對(duì)糖尿病大鼠腎組織nephrin表達(dá)的影響.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/b24a6e51-4e82-4d07-ac51-df0c8820ee1b/b24a6e51-4e82-4d07-ac51-df0c8820ee1b1.gif)
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1、目的:用鏈脲佐菌素(Streptozocin,STZ)誘發(fā)、建立糖尿病大鼠模型;觀察中藥復(fù)方“益腎湯”對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用及對(duì)nephrin表達(dá)的影響,并以血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(Angiotensinreceptorblocker,ARB)“纈紗坦”作為對(duì)照,探討“益腎湯”防治糖尿病腎病(Diabeticnephropathy,DN)的作用機(jī)制。 方法:成年雄性SD大鼠50只,隨機(jī)分成4組,分別為正常對(duì)照組(CON
2、)、糖尿病未治療組(DMN)、糖尿病纈紗坦治療組(ARB)、糖尿病益腎湯治療組(YS)。各糖尿病大鼠于空腹?fàn)顟B(tài)一次性腹腔內(nèi)注射2%STZ誘發(fā)糖尿病模型;72小時(shí)后測(cè)定血糖,如血糖>16.7mmol/L,并穩(wěn)定2-3天即算建模成功。ARB組給予纈紗坦,按20mg/公斤體重/天灌胃;YS組給予相當(dāng)于生藥6.5g/公斤體重/天的濃縮藥液灌胃;CON及DMN組按相當(dāng)劑量飲用水灌胃。各大鼠每周測(cè)量體重,根據(jù)體重調(diào)整喂藥量;10周后,測(cè)定每只大鼠體
3、重;留取24小時(shí)尿液,記尿量,測(cè)定24小時(shí)尿總蛋白、白蛋白含量;以10%水合氯醛麻醉處死大鼠,心臟取血測(cè)定血糖、糖化血紅蛋白(Hemoglobin,HbA1c)、血肌酐、血尿素氮、血胰島素等指標(biāo);取左腎經(jīng)生理鹽水洗滌并擦干后稱重;取右腎縱形切開一半以10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋,制作切片進(jìn)行免疫組化檢測(cè)nephrin的表達(dá)及分布,并利用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析;另一半右腎取皮質(zhì)標(biāo)本制作電鏡切片進(jìn)行電鏡觀察、拍照,應(yīng)用圖像分析儀對(duì)所拍
4、照片的腎小球毛細(xì)血管基底膜厚度(Glomerularbasementmembrane,GBM)進(jìn)行分析、測(cè)量。 結(jié)果:大鼠成功誘發(fā)糖尿病。體重:DMN組顯著低于CON、ARB、YS三組(p<0.05);而ARB、YS組與CON組比較無顯著差異。腎重量:ARB、YS組顯著大于CON、DMN組(p<0.05);而腎臟相對(duì)重量則糖尿病各組均顯著大于CON組,DMN顯著大于ARB與YS組(p<0.05)。血糖:糖尿病各組均顯著高于CON
5、組,ARB、YS二組顯著低于DMN組(p<0.05)。HbA1c:所有糖尿病組顯著高于CON組,ARB、YS組顯著低于DMN組(p<0.05)??崭挂葝u素:DMN組顯著低于其它3組(p<0.05),ARB、YS組與CON組間比較無顯著差異。24h尿量:所有糖尿病組均顯著高于CON組,ARB、YS顯著低于DMN組(p<0.05)。24h尿總蛋白:DMN組顯著高于其它3組(p<0.05),ARB、YS組與CON組間比較無顯著差異。24h尿白
6、蛋白:DMN組顯著高于其它3組,YS組顯著高于CON組(p<0.05),而ARB與CON組比較無顯著差異。血肌酐:各組間無顯著性差異。血尿素氮:DMN組顯著高于其余三組(p<0.05),CON、ARB、YS三組間無顯著性差異。GBM厚度:糖尿病各組顯著大于CON組,ARB、YS組顯著小于DMN組(p<0.05)。腎臟nephrin表達(dá):DMN組顯著低于其余三組,YS組顯著低于CON、ARB組(p<0.05);ARB與CON組比較無顯著差
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