1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文α黑素細(xì)胞刺激素基因修飾的PLP特異性T淋巴細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的治療作用姓名：韓德平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：田野蘋20040501第二軍醫(yī)大學(xué)博士論文中文摘要中文摘要自身免疫性疾病是因機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)自身成分發(fā)生免疫應(yīng)答而導(dǎo)致相應(yīng)組織器官甚至全身性的損傷以及功能障礙的一類疾病。對(duì)人類自身免疫病的認(rèn)識(shí)常通過研究一些在J臨床癥狀和組織病理學(xué)方面存在很大相似性的動(dòng)物模型來實(shí)現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性

2、腦脊髓炎(EAE)即是一種在動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)巾出現(xiàn)的自身免疫性炎癥和脫髓鞘病變，可分為主動(dòng)性復(fù)發(fā)緩解型EAE(REAE)和被動(dòng)轉(zhuǎn)移型EAE(tEAE)，常作為人類多發(fā)性硬化(MS)的動(dòng)物模型。目前，針對(duì)自身免疫病的異常免疫應(yīng)答，般是不加區(qū)別地給予免疫抑制劑，而躍期應(yīng)用免疫抑制劑可導(dǎo)致免疫系統(tǒng)的』。泛抑制、誘發(fā)感染和腫瘤，還不能有效地防止疾病的復(fù)發(fā)?；蛑委煹某霈F(xiàn)和發(fā)展為現(xiàn)代治療學(xué)開辟了一條新的途徑。對(duì)EAE基因治療的研究正方興

3、未艾，主要有兩種途徑，一是系統(tǒng)性基因治療，將治療陛基因重組入病毒載體或質(zhì)粒中注入血液或轉(zhuǎn)染致腦炎性自身反應(yīng)性11細(xì)胞后回輸體內(nèi)。：二是局部性基因治療，利用病毒載體、質(zhì)粒DNA或DNA一脂質(zhì)體復(fù)合物將治療性基因直接轉(zhuǎn)移至CNS內(nèi)。常用的病毒載體有逆轉(zhuǎn)錄病毒(RV)、腺病毒(Adv)、腺病毒相關(guān)病毒(AAV)、單純皰疹病毒(HSV)等。d黑索細(xì)胞刺激素(ixmelanocytestimulatinghormone，a—MSH)具有明確的抑制

4、炎癥和免疫調(diào)節(jié)活性，還可以促進(jìn)受損的外周神經(jīng)或脊髓修復(fù)。我們以前的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)腹腔多次注射c【一MSH，對(duì)EAE小鼠有較好的保護(hù)作用，其免疫學(xué)機(jī)制涉及抑制促炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生和增加抑炎性細(xì)胞因子的分泌。aMStl是人體內(nèi)存在的小分子調(diào)節(jié)肽，無抗原性，目前尚未發(fā)現(xiàn)有蓄積毒性。但是a—MSH半衰期較短、體內(nèi)代謝較快，需要反復(fù)多次注射是其缺點(diǎn)?；趦xMSH具有明確的抑制炎癥作用和神經(jīng)修復(fù)作用，以及rAAV對(duì)人無致病性，能感染分裂和非分裂細(xì)胞，

5、目的基因與宿主細(xì)胞基因組拯合使之能在體內(nèi)長期穩(wěn)定表達(dá)。而特異性自身反應(yīng)性T細(xì)胞具有至炎癥部位的歸巢特性，且僅在受特異性自身抗原活化時(shí)才表達(dá)目的基因產(chǎn)物。故本研究以小鼠EAE為動(dòng)物模型，用攜帶dMSH基因的rAAV轉(zhuǎn)染PLPⅢⅢI特異性T細(xì)胞。通過回輸dMSI1基因修飾的特異性自身反應(yīng)性T細(xì)胞(ixMStt，r細(xì)j魁)，研究對(duì)Pt，PⅢmI誘導(dǎo)小鼠FAE的治療作用，并探討相關(guān)的免疫學(xué)機(jī)制。本研究的目的是探索人類CNS自身免疫性懂性炎癥和脫