1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文脂筏神經(jīng)酰胺在TNFα激活人氣道上皮細(xì)胞DUOX1酶中的作用姓名：王麗芬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：耳鼻咽喉頭頸外科指導(dǎo)教師：甄宏韜201004華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文3DUOX1和P47phox的表達(dá)。2.利用激光共聚焦方法觀察細(xì)胞胞膜上的DUOX1和P47phox的表達(dá)，同時(shí)觀察兩者分別和脂筏標(biāo)記蛋白霍亂毒素B亞單位（CholeratoxinBsubunitCTXB）和神經(jīng)酰胺（Cerae

2、）的共定位現(xiàn)象。3.用活性氧檢測試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧的生成。結(jié)果：結(jié)果：在脂筏提取物中，TNFα刺激細(xì)胞引起DUOX1和P47phox在細(xì)胞膜脂筏區(qū)中的表達(dá)增加（P0.05），脂筏干擾劑可以抑制TNFα刺激引起的DUOX1和P47phox在細(xì)胞膜脂筏區(qū)中表達(dá)增加（P0.05）；TNFα刺激細(xì)胞后，在共聚焦顯微鏡下可以觀察到DUOX1和P47phox在細(xì)胞膜上明顯發(fā)生簇聚現(xiàn)象，同時(shí)DUOX1和P47phox分別與脂筏的標(biāo)記物霍亂毒素和神

3、經(jīng)酰胺（Cerae）呈現(xiàn)共定位現(xiàn)象，脂筏干擾劑可以抑制TNFα刺激引起的DUOX1和P47phox在細(xì)胞膜上簇聚以及共定位現(xiàn)象；TNFα刺激氣道上皮細(xì)胞可以明顯增加細(xì)胞內(nèi)的活性氧生成（P0.05），脂筏的干擾劑以及DUOX1的抑制劑可以抑制TNFα刺激引起的活性氧增加（P0.05）。結(jié)論：結(jié)論：TNFα可以引起氣道上皮細(xì)胞內(nèi)DUOX1、P47phox在脂筏中的含量增加，即DUOX1、P47phox向脂筏區(qū)轉(zhuǎn)移，從而導(dǎo)致該酶的激活，刺激活