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![CASK在癲癇患者和點(diǎn)燃鼠腦組織中的表達(dá)及其可能機(jī)制.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/a0b90c11-3db9-4632-861e-d123ec46027e/a0b90c11-3db9-4632-861e-d123ec46027e1.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探索CASK在難治性顳葉癲癇患者和癲癇大鼠模型中腦組織內(nèi)(海馬和皮質(zhì))的表達(dá)及其參與癲癇發(fā)作的可能機(jī)制。
方法:
按隨機(jī)化原則從課題組建立的難治性癲癇患者術(shù)后腦組織庫(kù)中抽取30例難治性癲癇患者腦組織,分別用免疫熒光,免疫組化和western blotting檢測(cè)CASK的表達(dá),并與年齡、性別相似的非癲癇患者腦組織進(jìn)行比較,完成后選擇56只健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為8組(每組n=8):對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組
2、——點(diǎn)燃后隨機(jī)分為6h,1d,3d,7d,14d,30d,60d這7組,再次通過(guò)免疫熒光,免疫組化和westernblotting驗(yàn)證CASK在腦內(nèi)的表達(dá);隨后采用慢病毒抑制大鼠腦內(nèi)CASK的表達(dá),點(diǎn)燃這些大鼠并在點(diǎn)燃1h內(nèi)觀察干預(yù)前后大鼠行為學(xué)的改變和進(jìn)一步運(yùn)用western blotting驗(yàn)證干預(yù)前后CASK復(fù)合物下游分子NMDAR2b在點(diǎn)燃后的表達(dá)。
結(jié)果:
人和動(dòng)物腦組織標(biāo)本的免疫熒光結(jié)果均顯示CASK僅在
3、神經(jīng)元中表達(dá),而在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中不表達(dá),且免疫組化結(jié)果顯示CASK在實(shí)驗(yàn)組的陽(yáng)性表達(dá)明顯高于對(duì)照組。在人的腦組織樣本中,Westernblotting檢測(cè)發(fā)現(xiàn)CASK蛋白在顳葉癲癇患者皮質(zhì)中的表達(dá)明顯高于對(duì)照組(p<0.05)。在實(shí)驗(yàn)鼠的腦組織中,CASK在海馬的表達(dá)表現(xiàn)為點(diǎn)燃后1d降至最低,后逐漸增高直至60d(p<0.05,除外點(diǎn)燃后14天);CASK在皮質(zhì)中的表達(dá)表現(xiàn)為點(diǎn)燃后6h開(kāi)始增高,且維持高水平直至60d(p<0.05)。在
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