1、目的:研究上皮鈣黏附蛋白(E-cadherin)在正常的胃粘膜上皮細胞、正常的支氣管粘膜上皮細胞、胃腺癌細胞和肺腺癌細胞中的表達情況及其差異，并探討此種差異的內在機制。
　　方法:第一部分是選取正常的胃粘膜上皮細胞（GES-1細胞）、正常的支氣管粘膜上皮細胞（HBE細胞）、胃腺癌細胞（SGC-7901、MGC-803和BGC-823細胞）和肺腺癌細胞(A549細胞)作為研究對象，提取各細胞株總RNA采用RT-PCR技術檢測E-ca

2、dherin在mRNA水平的表達情況;提取各細胞株總蛋白采用免疫印跡(WesternBlot)技術檢測E-cadherin在蛋白水平的表達情況。第二部分是抽提各細胞株DNA，采用MSP（甲基化特異性PCR）和BSP(亞硫酸氫鹽修飾后測序PCR)來檢測各細胞株E-cadherin基因啟動子區(qū)CpG島的甲基化水平。第三部分是使用轉甲基酶抑制劑5-氮雜胞苷（5-Azacytidine）作用于各細胞株72h后應用RT-PCR技術檢測各細胞株中E

3、-cadherin表達水平的變化以進一步探究E-cadherin表達與甲基化之間的關系。
　　結果:1.E-cadherin僅在HBE細胞中表達，在其余各細胞中不表達。2.MSP和BSP顯示四種腫瘤細胞的E-cadherin基因啟動子區(qū)的CpG島均存在高甲基化，而GES-1和HBE兩種正常的上皮粘膜細胞中則幾乎不存在甲基化。3轉甲基酶抑制劑5-氮雜胞苷(5-Azacytidine)能夠使各腫瘤細胞株中E-cadherin在mRNA

4、水平上恢復表達，但不能使GES-1細胞中E-cadherin恢復表達，亦不能使HBE細胞中E-cadherin表達增加。
　　結論:E-cadherin的表達水平與E-cadherin基因啟動子區(qū)的甲基化水平都存在密切的關系。四種腫瘤細胞中E-cadherin的缺失可能與其基因啟動子區(qū)的高甲基化有關。而GES-1細胞中E-cadherin的缺失則與甲基化無關，缺失的原因需要進一步研究。亞硫酸氫鹽修飾后PCR(BSP)聯(lián)合TA克隆測