1、目的：蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)是神經內、外科的常見疾病，慢性腦積水是SAH后的常見慢性并發(fā)癥。柔腦膜是蛛網(wǎng)膜、軟腦膜及兩者之間的蛛網(wǎng)膜下腔的統(tǒng)稱，其蛛網(wǎng)膜細胞是特化的成纖維細胞。轉化生長因子-β1(TGF-β1)具有促進成纖維細胞增殖和分泌的作用。SAH后腦脊液中的TGF-β1升高，能使柔腦膜的蛛網(wǎng)膜和蛛網(wǎng)膜下腔、以及蛛網(wǎng)膜顆粒等部位的纖維增生，導致慢性腦積水。核心蛋白聚糖(DCN)被認為是TGF-β1的天然拮抗劑，具有抗纖維化作用。利

2、用DCN拮抗TGF-β1，減輕柔腦膜的蛛網(wǎng)膜和蛛網(wǎng)膜下腔、以及蛛網(wǎng)膜顆粒等部位的纖維增生，來預防SAH后慢性腦積水的發(fā)生，具有一定的現(xiàn)實意義。目前對此尚無研究報道，本研究旨在此做初步探索，研究DCN對SAH后柔腦膜纖維化的干預。 方法：首先，將80只SD大鼠隨機分為空白組(20只)、生理鹽水I組(NS I組30只)和模型I組(SAH I組30只)，采用枕大池兩次注血法建立鼠實驗性SAH動物模型。分別在第3、6、10、14、21天

3、處死大鼠，在第3天取腦觀察蛛網(wǎng)膜下腔的積血；在所有時間點均取腦脊液檢測TGF-β1、PICP的濃度觀察其動態(tài)變化；在第21天取腦觀察柔腦膜的纖維化程度。 然后，將40只SD大鼠隨機分為實驗組、對照組、模型Ⅱ組(SAHⅡ組)、生理鹽水Ⅱ組(NSⅡ組)，每組各10只，實驗組和對照組在第2、10天分別給予外源性DCN。在第21天檢測腦脊液的TGF-β1、PICP濃度和柔腦膜的纖維化程度。 柔腦膜纖維化的檢測方法包括：膠原纖維M

4、ASSON染色、I型膠原蛋白(Col I)mRNA、結締組織生長因子(CTGF)mRNA的RT-PCR法檢測及其蛋白的Western blot法檢測。 結果： 1、SAH動物模型的制作 ①造模第3天，在大腦半球及腦底的蛛網(wǎng)膜下腔(或腦池)可見散在的小血凝塊，切片染色顯示在硬腦膜與腦組織之間柔腦膜內可見紅細胞，構模成功； ②SAH I組腦脊液中的TGF-β1較Ns I組明顯升高并呈雙時相； ③SAH

5、 I組腦脊液中的PICP濃度逐漸升高，第6天開始顯著高于NS I組； ④MASSON染色顯示SAH I組柔腦膜的灰度值顯著低于NSI組、厚度顯著高于NSI組； ⑤SAH I組的col I mRNA、CTGF mRNA及蛋白的表達量均顯著高于NS I組； ⑥空白組與NS I組間的各指標均無顯著性差異。 2、DCN的干預 ①實驗組與SAH Ⅱ組比較：實驗組的TGF-β1稍低但無顯著性、PICP顯著降低

6、；MASSON染色顯示實驗組柔腦膜的厚度稍低但無顯著性、灰度值顯著升高；實驗組Col I mRNA表達量明顯減少、CTGFmRNA表達量稍減少但無顯著性；實驗組的Col I和CTGF的表達量均明顯減少； ②實驗組與NSⅡ組比較：實驗組的TGF-β1、PICP顯著增高；MASSON染色顯示實驗組柔腦膜的厚度明顯增大、灰度值明顯降低；實驗組Col.I mRNA、CTGF mRNA及蛋白的表達量均明顯增高； ③對照組與NS Ⅱ