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![小腦皮質(zhì)顆粒與分子層對(duì)面部刺激反應(yīng)的場(chǎng)電位特征.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-2/24/12/f662ead3-f007-4b0c-a32f-da3051bf02a0/f662ead3-f007-4b0c-a32f-da3051bf02a01.gif)
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1、外部信息通過(guò)爬行纖維和苔狀纖維傳入小腦皮層后,調(diào)節(jié)神經(jīng)元活動(dòng),參與運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)和運(yùn)動(dòng)學(xué)習(xí),可是有關(guān)外部相關(guān)信息在哺乳動(dòng)物小腦皮質(zhì)中傳遞的細(xì)胞、突觸以及動(dòng)力學(xué)機(jī)制還不明確。因此,本研究應(yīng)用局部場(chǎng)電位記錄結(jié)合藥理學(xué)技術(shù),研究小鼠小腦皮質(zhì)顆粒層和分子層對(duì)感覺(jué)刺激三叉神經(jīng)的場(chǎng)電位反應(yīng)特征,明確感覺(jué)刺激誘發(fā)小鼠小腦皮層顆粒細(xì)胞層和分子層場(chǎng)電位反應(yīng)動(dòng)力學(xué)特征及藥理學(xué)機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)選用6-8周齡的昆明小鼠,經(jīng)腹腔注射劑量為1.3 g/kg的烏拉坦
2、麻醉后,在小腦 Crus II小葉進(jìn)行開(kāi)顱術(shù),開(kāi)孔直徑約為1.5毫米,仔細(xì)除去該部位硬腦膜后,用泵給暴露部位的腦表面持續(xù)灌流人造腦脊液;面部刺激選用一定壓力的瞬間吹風(fēng)刺激刺激相同側(cè)胡須墊(5-500 ms,50-60 psi),刺激裝置由電腦和膜片鉗記錄軟件控制 MASTER-8,并且與電生理信號(hào)記錄同步進(jìn)行;場(chǎng)電位記錄部位選用顆粒與分子層,在記錄的電極內(nèi)部灌裝20-30 ul人工腦脊液,電極電阻大概為4-6 MΩ;通過(guò)美國(guó)產(chǎn)膜片鉗之放
3、大器(Axopatch-200B)及Clampfit10.3數(shù)據(jù)收集軟件記錄面部刺激誘發(fā)顆粒和分子層的場(chǎng)電位反應(yīng);電生理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析采用膜片鉗數(shù)據(jù)分析軟件(版本10.3)。各組數(shù)據(jù)均用《均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤》來(lái)表示,樣本數(shù)用n表示。相關(guān)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析應(yīng)用SPSS軟件(版本16.0),采用paired-T檢驗(yàn)比較均數(shù),當(dāng)P小于0.05時(shí),可以認(rèn)為有顯著性差異。
本實(shí)驗(yàn)有如下結(jié)果:
?。?)在烏拉坦麻醉下,吹風(fēng)刺激小鼠同側(cè)觸須
4、墊可誘發(fā)分子層產(chǎn)生場(chǎng)電位反應(yīng),表現(xiàn)為如下波形:(1)N1,瞬間負(fù)極性波;(2)P1,大的正極性波,N1平均的振幅值為0.13±0.06 mV,P1平均振幅值為0.36±0.08 mV。反應(yīng)潛伏期的平均值為13.21±0.32 ms。吹風(fēng)刺激結(jié)束可以誘發(fā)場(chǎng)電位反應(yīng)(P2),但需要刺激時(shí)間大于60ms。
?。?)A型GABA受體(GABAA)的阻斷劑一方面完全地阻斷了P1,并出現(xiàn)了N2,也就是第二個(gè)負(fù)波,表明信息經(jīng)PF傳人后產(chǎn)生N1
5、,浦肯野細(xì)胞被抑制后產(chǎn)生由 GABAA受體介導(dǎo)的P1,GABAA受體的活性被阻斷后,面部刺激導(dǎo)致浦肯野細(xì)胞興奮并出現(xiàn)了N2。
?。?)吹風(fēng)刺激可誘發(fā)小腦Crus II區(qū)顆粒細(xì)胞層產(chǎn)生場(chǎng)電位反應(yīng),當(dāng)刺激持續(xù)時(shí)間為5-10 ms時(shí),可誘發(fā)單峰場(chǎng)電位反應(yīng)。當(dāng)刺激持續(xù)時(shí)間大于30 ms時(shí),吹風(fēng)刺激誘發(fā)雙峰反應(yīng),第一個(gè)峰值(N1)為刺激開(kāi)始反應(yīng),其振幅的平均值為0.82±0.06 mV,具有“全和無(wú)”特征。第二峰值(N2)為刺激結(jié)束反應(yīng),
6、其振幅隨著刺激持續(xù)時(shí)間的增加而增大。
(4)小腦皮質(zhì)顆粒層對(duì)面部刺激的反應(yīng)表現(xiàn)為很高的反應(yīng)頻率特性,刺激頻率從1 Hz-33 Hz的刺激串,可誘發(fā)顆粒細(xì)胞層反應(yīng),但隨著刺激頻率的增高,在第一個(gè)反應(yīng)后可出現(xiàn)不同程度的反應(yīng)壓抑現(xiàn)象。刺激頻率大于4 Hz時(shí),第二個(gè)反應(yīng)開(kāi)始振幅顯著減小(P<0.05)。
(5)腦表面灌流 TTX完全阻斷感覺(jué)刺激誘發(fā)顆粒細(xì)胞層場(chǎng)電位反應(yīng),N1峰值降至給藥前的4.6±1.31%(P<0.001)
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