1、目的:
　　成功建立大鼠SAH后CVS模型，利用印度墨汁染色腦血管澆鑄實驗法測定和對比腦基底動脈直徑的改變。應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡、電鏡等技術(shù)觀察大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血腦血管痙攣前后腦基底動脈各層中Cx43和Cx40表達的改變及其縫隙連接超微結(jié)構(gòu)特征，進一步探討大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后腦血管痙攣發(fā)生機制及其縫隙連接在其中可能發(fā)揮的作用。
　　方法:
　　1、選以成年SD大鼠（南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物科學(xué)部提供）作為模型動物，采用經(jīng)

2、枕大池二次注血建立蛛網(wǎng)膜下腔出血腦血管痙攣模型實驗方法。
　　2、CVS模型檢測:采用腦血管澆鑄法分別測定正常組和SAH3d、7d、14d組大鼠基底動脈直徑來證實腦血管痙攣(CVS)的存在。
　　3、本實驗應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微鏡觀測縫隙連接蛋白Cx43和Cx40在腦基底動脈管壁各層分布情況，應(yīng)用程序圖象對將其所得數(shù)字化圖像進行計算機中進行處理分析。對縫隙連接蛋白Cx40和Cx43像素密度和其熒光斑面積的大小的進行準(zhǔn)確測定，

3、并將應(yīng)用所獲得的圖像素密度和熒光斑面積大小來代表Cx40和Cx43的數(shù)量，從而達到對其進行準(zhǔn)確定量分析目的。
　　4、應(yīng)用掃描電鏡和超薄切片研究方法觀察大鼠SAH后腦血管痙攣前后縫隙連接(GJ)的形態(tài)學(xué)特征。
　　結(jié)果:
　　1、實驗過程中大鼠的死亡率18％左右，大多數(shù)死亡均發(fā)生在首次枕大池穿刺造模和二次枕大池穿刺注血造模時。成功建立大鼠可靠蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后腦血管痙攣(CVS)動物模型，成功建模后的大鼠出現(xiàn)不

4、同程度的肢體癱瘓、不能正常行走、精神萎靡、畏光、卷縮等表現(xiàn)。成功造模后顱內(nèi)SAH血凝塊大部分分布在基底池、環(huán)池、端腦表面溝回、鞍上池等處。大多數(shù)大鼠48小時后行二次經(jīng)枕大池注血造模穿刺時即可見穿刺針頭發(fā)現(xiàn)有血性腦脊液流出，這也間接說明SAH模型制造成功，成功率一般均≥92％上。
　　2、利用腦血管澆鑄法分別測定正常組和SAH3d、7d、14d組大鼠基底動脈直徑來證實腦血管痙攣(CVS)的發(fā)生;與正常組相比較，SAH3d、7d組大鼠

5、基地動脈直徑明顯縮小、可見管壁不同程度增厚，而14d組中大鼠腦基底動脈直徑變化不明顯更接近正常組。
　　3、a、正常大鼠組中在腦基底動脈內(nèi)皮、血管外膜和平滑肌層表達少見上主要以表達Cx43為主。b、當(dāng)CVS后CVS大鼠腦基底動脈Cx43在平滑肌中表達明顯增加。c、正常情況下Cx40主要存在于平滑肌層，但CVS后Cx40平滑肌中表達亦增加但不如Cx43增加明顯。
　　4、電鏡下可見正常組中大鼠腦基底動脈血管呈典型的三層結(jié)構(gòu)（外

6、膜層、梭型平滑肌層和平滑的內(nèi)膜層）排列整齊;大鼠基底動脈單層扁平狀血管內(nèi)皮細胞光滑，層次排列正常、管壁無增厚、余無異常改變。連續(xù)單層覆蓋于內(nèi)彈力上，細胞核呈錘狀，細胞核膜邊緣清晰;外膜細胞核梭形、光滑。而在SAH實驗組大鼠基底動脈管壁檢測到了陽性的病理性改變:SAH后第3、7和14天分別均可見血凝塊附著，管壁內(nèi)皮細胞變性、核固縮、細胞之間融合、部分甚至壞死、脫落、細胞間隙增寬;內(nèi)彈力膜層增厚，線粒體變形，平滑肌細胞缺乏典型的梭形形態(tài)，彈

7、力纖維層扭曲變形消失、細胞外膜增厚，以上各細胞之間以及細胞均發(fā)現(xiàn)有縫隙連接存在。
　　本研究還發(fā)現(xiàn)無論正常組還是異常組血管外膜、內(nèi)皮細胞之間和平滑肌細胞三層細胞之間都存在縫隙連接，但有意義的是SAH時這些縫隙連接通道的數(shù)量明顯增加。
　　結(jié)論:
　　1、SAH后CVS的發(fā)生與腦血管的病理改變持續(xù)存在密切相關(guān);
　　2、正常情況下Cx43主要分布在細胞內(nèi)皮和血管外膜而Cx40主要在血管平滑肌層表達;
　　3、