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文檔簡介
1、趨化因子SDF—1a及其受體CXCR4在胚胎發(fā)育、腫瘤細胞轉(zhuǎn)移及介導免疫缺陷病毒(HIV)感染等方面起著重要作用。最近研究表明SDF—1a在動脈粥樣硬化斑塊中高表達,SDF—1a/CXCR4與動脈粥樣硬化的關(guān)系已經(jīng)引起重視。 本研究首先探討ox—LDL對內(nèi)皮細胞上SDF—1a表達的影響,然后用SDF—1a處理的THP—1單核細胞上對CXCR4的表達進行研究,最后對SDF—1a/CXCR4在單核細胞/血管內(nèi)皮細胞黏附的作用進行研究
2、。 目的:ox—LDL對內(nèi)皮細胞SD—1a表達的影響;SDF—1a對THP—1單核細胞上CXCR4表達的影響:SDF—1a和CXCR4抗體干預對THP—1單核細胞與內(nèi)皮細胞黏附的影響;以便探討SDF—1a促進單核細胞與內(nèi)皮細胞黏附作用的機制。 方法:RT—PCR檢測SDF—1a和CXCR4mRNA的表達,Westernblot檢測其蛋白表達變化,觀察ox—LDL對內(nèi)皮細胞上SDF—1a表達的劑量和時間效應,觀察SDF—1
3、a對THP—1單核細胞CXCR4表達的影響。用靜態(tài)黏附實驗來研究THP—1與內(nèi)皮細胞的黏附,用25μg/mlox—LDL或不同濃度SDF—1a處理內(nèi)皮細胞48h或30min后,將THP—1單核細胞與內(nèi)皮細胞共孵育后洗脫檢測黏附作用,并加用不同濃度的CXCR4抗體阻斷。 結(jié)果:SDF—1a在正常的血管內(nèi)皮細胞上幾乎不表達,ox—LDL可以上調(diào)內(nèi)皮細胞上SDF—1a表達,0—125μg/mlox—LDL處理48h,隨ox—LDL濃度
4、增加,SDF—1a的表達亦逐漸增強,當ox—LDL濃度為25μg/ml處理48h,SDF—1a表達到達峰值。用25μg/mlox—LDL與內(nèi)皮細胞孵育0—48h,隨著處理時間的延長,SDF—1a表達逐漸的增強,在48h時SDF—1a的表達達到最大。100ng/mlSDF—1a可以上調(diào)THP—1單核細胞上CXCR4的表達。Ox—LDL可以增強THP—1與內(nèi)皮細胞的黏附,25μg/mlox—LDL處理組THP—1與內(nèi)皮細胞的黏附細胞數(shù)最多,
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